Klf4 actúa como gen supresor de tumor en un modelo murino de cáncer bucal con activación de K-ras.

ABRIGO M.; CALB D.; PAPARELLA M. L. ; BAL DE KIER JOFF¨¦ E; GUTKIND JS; RAIMONDI A. R.

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Cientifica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011

Sociedad Argentina de Investigacion Clínica

Klf4 actúa como gen supresor de tumor en un modelo murino de cáncer bucal con  activación de K-ras.   Marianela Abrigo, Diego Calb, Maria L Paparella1, Elisa Bal de Kier Joffé E., Silvio J Gutkind2, Ana R. Raimondi. Área de Investigación, Instituto Ángel H Roffo, UBA, Argentina. 1.Cátedra de Anatomía Patológica, FOUBA. Bs. As. Argentina. 2. NIDCR, National Institute of Health USA.   El carcinoma de células escamosas bucal ocupa el sexto lugar entre los cánceres mas frecuentes y la tasa de sobrevida aun hoy es menor al 50%, lo cual refleja la necesidad de generar conocimiento mas detallado sobre su desarrollo. Previamente hemos generado un modelo de ratones transgénicos (K14-CreERTAM /K-rasG12D) para estudiar este cáncer, los cuales desarrollan papilomas bucales e hiperplasias de lengua. El factor de transcripción Klf4 regula la proliferación y diferenciación celular y está ausente en cáncer de estómago entre otros. Objetivo: estudiar el rol de Klf4 en la tumorigénesis bucal analizando el efecto de su ablación cuando   Kras esta activado. Se utilizaron ratones knockout condicionales Klf4flox/flox, generamos una línea K14-CreERTAM /K-rasG12D/ Klf4 -/- por retrocruza con K14-CreERTAM /K-rasG12D. Los ratones fueron genotipados por PCR y a los 30 días de edad se realizó la inducción del sistema con tamoxifeno. Estudiamos la expresión de KLF4 en las lesiones de los animales K-rasG12D por western blot e inmunohistoquímica observando su expresión en ambos casos. El índice de proliferación valorado con PCNA por IHQ (IP: células positivas/células totales) de las lenguas Kras vs control no fue significativo (p= 0,3). Luego de la ablación de Klf4 en los ratones Kras, la nueva línea K14-CreERTAM /K-rasG12D/ Klf4 -/- desarrolló displasias, CIS y carcinomas verrugosos de lengua. Los animales Klf4 -/- no desarrollaron fenotipo. Un análisis de sobrevida (Kaplan-Meier) reveló diferencias significativas entre las líneas Kras (56 días), Kras/ Klf4 -/- (24 días) y Klf4 -/- (3 meses) (p<0,001 Log-Rank test). Las displasias expresaron queratinas 1 y 14 y los CIS y CA variaron el patrón de queratina 1 vs control (IHQ). Se estudió el IP de todas las lesiones encontrando que los animales Kras/ Klf4 -/- (0,9±0,01) difirieron significativamente del resto (K-ras: 0,57±0,03, Klf4 -/- 0,47±0,008, wild type: 0,6±0,01), ANOVA p<0,001 post hoc Holm-Sidak. Analizamos la expresión de p27 (WB) que regula el ciclo celular inhibiéndolo, encontrando disminución de su expresión en los papilomas y CA de los animales  Kras/ Klf4 -/- vs control. La deleción de Klf4 junto a K-rasG12D produjo la transformación maligna del epitelio de la lengua en nuestro modelo. Estos resultados sugieren que Klf4 actúa como un gen supresor de tumor en la lengua.