Caracterización fenotípica y molecular de la resistencia a las equinocandinas en aislamientos clínicos del complejo Candida glabrata. Período 1984-2014

MORALES-LOPEZ, SORAYA; DUDIUK, CATIANA; TAVERNA, CONSTANZA; BOSCO-BORGUEAT , M; GARCIA, GUILLERMO; CORDOBA, SUSANA

Congreso; Infocus 2015; 2015

Introducción: Candida glabrata es responsable del 15-20% de las infecciones por Candida y es considerada un patógeno oportunista mayor causante de infecciones comunitarias y nosocomiales. El tratamiento de las infecciones suele ser difícil y en los casos de candidemia y candidiasis invasoras, ESCMID e IDSA han propuesto el uso de las equinocandinas como primera opción de tratamiento. Recientemente se han descrito dos especies crípticas: Candida nivariensis y Candida bracarensis. Sin embargo, no han sido reportadas en Latinoamérica y aún no existen recomendaciones para su tratamiento. La falta de datos epidemiológicos a gran escala que permitan tener una visión global del comportamiento de la sensibilidad de estos agentes justifica la realización de este trabajo. Objetivo: Caracterizar fenotípica y molecularmente la sensibilidad a las equinocandinas (caspofungina y anidulafungina) en aislados clínicos del complejo C. glabrata Metodología: Se incluyeron 114 aislados clínicos de C. glabrata, 6 de C. nivariensis y 3 de C. bracarensis conservadas en una colección del cultivos y recolectados durante 1984-2014. Los aislados fueron identificados por métodos bioquímicos (zimograma, auxonograma, micro-macromorfología), proteómicos (MaldiTof) y moleculares. La determinación de la CIM se determinó por microdilución en caldo. La interpretación de los resultados para anidulafungina se realizó de acuerdo al estándar EDEF 7.2 del EUCAST (R>0.06) y para caspofungina, se emplearon puntos de corte del documento M27-S4 del CLSI (R≥0.05). Se realizó sensibilidad por tiras Etest® en un aislado de C. nivariensis y dos de C. bracarensis, en quienes por escaso crecimiento no fue posible determinar la CIM por microdilución. La resistencia molecular a las equinocandinas se estudió en C. glabrata por PCR para identificar cinco mutaciones en el Hot Spot 1 de Fks1 y Fks2 (Fks1p-F625; Fks1p-S629, Fks1p-D362; Fks2-F659 y Fks2- S663). Resultados: En general, no se detectaron cepas resistentes a equinocandinas. Los valores de CIM según las especies del complejo C. glabrata se presentan en el siguiente cuadro:Ciento trece cepas de C. glabrata fueron negativas para mutaciones en Hot Spot 1 de Fks1 y Fks2. Sólo una cepa presentó un perfil compatible con mutación en Fks1p-S629. Mediante secuenciación se demostró sustitución de una única base nitrogenada, sin producir cambios en la secuencia aminoacídica. Conclusiones: No se observó expresión fenotípica de resistencia a equinocandinas entre las cepas del complejo C. glabrata. Tampoco se encontraron cepas con mutaciones aminoacídicas en el Hot Spot 1 de FKS1 y FKS2 entre las cepas de C. glabrata y los resultados de secuenciación confirmaron que la mutación Fks1p-S629 fue silente. Para C. glabrata, en todos los casos existió concordancia entre los resultados de las técnicas fenotípicas y moleculares para determinar resistencia a equinocandinas.