El tamaño de la cápsula de Cryptococcus neoformans altera los diámetros de inhibición por fluconazol.

BARBAGELATA, MARÍA SOL; BENITEZ, CECILIA; GUELFAND, LILIANA; ERBIN, M; GARCIA, GUILLERMO; GAMARRA, SOLEDAD

Córdoba

Congreso; Infocus 2015; 2015

Introducción La levadura capsulada Cryptococcus neoformans es una de las principales causas de meningitis en pacientes HIV positivos. Para el tratamiento de estas infecciones se utiliza anfotericina B (terapia de inducción) seguida de fluconazol (para consolidación y profilaxis). A pesar de que estos tratamientos suelen estar respaldados por pruebas de sensibilidad in vitro, las recidivas son comunes y la/s causa/s de las mismas se desconocen. C. neoformans en el líquido cefalorraquídeo presenta capsulas muy evidentes que reducen su tamaño cuando son cultivadas en medios artificiales como el Agar Sabouraud (AS). Córdoba y cols. demostraron que las cepas con capsulas más grandes son más resistentes in vitro a la actividad fungicida de anfotericina B que las cepas con capsulas pequeñas. Objetivo Evaluar la actividad in vitro del fluconazol sobre C. neoformans en condiciones más cercanas a lo que sucede en pacientes infectados (con cápsulas más grandes) y comparar la actividad de este azol sobre la misma cepa con cápsula pequeña. Material y métodos Evaluamos la sensibilidad de 34 cepas clínicas de C. neoformans a fluconazol siguiendo el método descrito en el documento M44A2 de CLSI (difusión en agar). Se utilizó como medio de cultivo el Mueller-Hinton-2% glucosa-0.5mg% azul de metileno y discos de papel con 25 g/ml de fluconazol. Además, se determinó la CIM de los mismos aislamientos siguiendo los documentos M27A3 y M27S4 de CLSI para comparar estos valores (gold standard) con los diámetros obtenidos por difusión. Los experimentos de evaluación de la sensibilidad a fluconazol por difusión en agar se realizaron con las cepas cultivadas a 35ºC durante 3 días en condiciones de inducción de cápsula y en condiciones de cultivo comunes. La inducción de cápsula se realizó incubando las cepas en AS bicarbonato en atmósfera de 5% de CO2 mientras que las condiciones comunes consistieron en el cultivo en AS sin modificar la atmósfera (aire ambiente). Resultados La CIM (media geométrica) de los aislamientos estudiados fue de 2,77 g/ml (rango 0,25 ? 8 g/ml). Los diámetros obtenidos tuvieron un promedio de 30,12 mm (experimentos sin inducción de cápsula) y de 27,3 mm (con inducción). A pesar de que la inducción de cápsula disminuye los diámetros promedios, esto solo se observó en 23 de las cepas estudiadas mientras que las 11 cepas restantes presentaron mayores diámetros de inhibición. Por otro lado, cuando los diámetros de inhibición se compararon con los datos obtenidos por el método de CIM no existió buena correlación. Conclusiones Los resultados obtenidos con la técnica de difusión en agar para evaluar la sensibilidad al fluconazol en C. neoformans no es comparable con los datos obtenidos por el método gold standard. Además, los diámetros varían y de manera aleatoria según los C. neoformans tengan o no cápsula.