ROL DEL ANIÓN CLORURO COMO SEGUNDO MENSAJERO EN LA MODULACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE GENES ESPECÍFICOS.

VALDIVIESO, A.G.; CLAUZURE, M.; MASSIP COPIZ, M.M.; CANCIO, C.E.; MORI, C.; ASENSIO, C.J.A.; SANTA COLOMA, T.A .

Mar del Plata

Congreso; LX REUNIÓN DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA (SAIC); 2015

SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA (SAIC)

La Fibrosis Quística (FQ) es causada por mutaciones en el gen CFTR que codifica un canal de transporte de iones cloruro (Cl-) activado por AMPc. Numerosos genes-CFTR dependientes han sido identificados,aunque se desconoce el mecanismo de regulación involucrado.Debido a que el CFTR es un canal de Cl-, la alteración de su actividad conduciría a cambios en la concentración intracelular de Cl- ([Cl-]i).Nuestra hipótesis es que la [Cl-]i podría formar parte del mecanismo de señalización en la modulación de genes específicos. Mediante la técnica de Differential display se analizó el perfil de expresión en células IB3-1, línea celular de FQ, incubadas con una curva de concentración de Cl- en presencia de dos ionóforos (tributyltin y nigericina), lo que permite equilibrar rápidamente la [Cl-]i con la concentración de Cl- extracelular, independientemente de la funcióndel CFTR y de otros canales de Cl-. Mediante esta estrategia,observamos varios genes expresados diferencialmente. Dos de estos genes expresados diferencialmente por la [Cl-]i fueron aislados,clonados y secuenciados. La modulación de la expresión de estos genes por el anión Cl- fue validada por RT-PCR cuantitativa en tiempo real. El primero de estos genes fue identificado como el gen RPS27 que codifica la proteína ribosomal S27. El mismo mostró una regulación negativa por el aumento de la [Cl-]i salvo a concentraciones no fisiológicas, por encima de 100 mM, para las cuales mostró una modulación positiva (respuesta bifásica para la [Cl-]i). El segundo gen identificado, modulado positivamente por el aumento de la [Cl-]i,correspondió al gen GLRX5, que codifica la proteína glutarredoxina-5,de localización mitocondrial. Estos resultados sugieren que el anión Cl- actuaría como segundo mensajero, modulando la expresión de genes específicos en respuesta a cambios en la [Cl-]i. Agradecimientos: CONICET, PIP2012-2014-0685 y PICT2012-1278de la ANPCYT.