Fotoinactivación de Staphylococcus aureus en crecimiento planctónico y en biopelícula

GÁNDARA L, CALVO G, DOTTO C, MAMONE L, DI VENOSA G, TARSIA F, BUZZOLA F, CASAS A.

Buenos Aires

Congreso; 15° Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas de la Universidad de Buenos Aires; 2014

Hospital de Clínicas de la Universidad de Buenos Aires

Objetivo Staphylococcus aureus es un patógeno oportunista que frente al compromiso de la integridad de piel y mucosas puede causar infecciones de diversa severidad. La creciente emergencia de resistencia antibiótica entre los aislamientos de S. aureus ha llevado a la búsqueda de terapias antimicrobianas alternativas. La Fotoinactivación bacteriana (FIB) consiste en emplear la acción de un fotosensibilizante no tóxico en oscuridad, el cual es activado por luz visible, conduciendo a la muerte del patógeno. En el presente trabajo se estudiaron distintos aspectos de la FIB de S. aureus mediada por el FS Azul de Toluidina (AT) sola o en combinación con tratamiento fototérmico.Materiales y métodos Luego de una pre-incubación en oscuridad con la máxima concentración no tóxica del AT, se iluminaron placas multiwell conteniendo las suspensiones bacterianas, con un arreglo de tubos fluorescentes. La viabilidad post-tratamiento se determinó mediante conteo de colonias. Para la FIB de biopelículas se empleó un láser de 635 nm, con el cual se irradiaron biopelículas desarrolladas en medio TSB suplementado con glucosa, y posteriormente se realizó el recuento de colonias luego de raspado con anza de la biopelícula remanente. El tratamiento fototérmico se llevó a cabo irradiando las biopelículas con un láser diodo de 980 nm. Para el análisis de la combinación del tratamiento enzimático con FIB, se incubaron las biopelículas con proteinasa K, previo al tratamiento de FIB-AT.Resultados Al fotoinactivar suspensiones bacterianas de la cepa RN6390 de S. aureus se observó un grado de inactivación dependiente de la concentración del AT y la dosis lumínica (p