Movilización de calcio intracelular inducida por angiotensina II (AII): desensibilización y variaciones a lo largo del ciclo estral

SUÁREZ CECILIA, GONZÁLEZ IGLESIAS A, FEIERSTEIN C, DÍAZ-TORGA G, BECÚ-VILLALOBOS D

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; XXX Reunión de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 1998

SAFE

En el presente trabajo caracterizamos el proceso de la desensibilización de la respuesta de [Ca++]i a AII mediante el método fluorimétrico de Fura-2AM. Determinamos la concentración necesaria para desensibilizar el aumento de [Ca++]i a un segundo estímulo de AII (primer estímulo entre 10-10 y 10-7M, segundo estímulo 10-7M aplicado a los 2 min del primero). Observamos una desensibilización a concentraciones crecientes del primer estímulo. El incremento de [Ca++]i a AII 10-7M (fase espiga) fue de 50.7±10.9%, y con previa exposición a AII 10-10, 10-9, 10-8 y 10-7 M fue de 57.4±2.9, 23.7±5.4, 5.5±0.6 y 3.2±0.2%, respectivamente. En segundo término calculamos el tiempo de latencia necesario para que la célula se recupere de su refractariedad a un previo estímulo de AII 10-6M. Se lavó el primer estímulo y luego las células fueron expuestas a AII 10-7M a los 15, 30, 60, 120 o 240 min. Se observó que en células preincubadas con buffer el incremento de [Ca++]i (fase espiga) fue de 39.7±3.4%. Hasta los 180 min la respuesta no se recuperó totalmente (15 min 11.6±2.0%, 30 min 18.9±3.7%, 60 min 19.5±2.5%, 180 min 20.4±1.3%, p<0.05 vs control). A los 240 min la respuesta era similar a la de la no preincubada con AII (38.4±1.6%). La desensibilización a tiempos tempranos no estaba directamente relacionada al vaciamiento del reservorio de calcio del retículo como lo indicaba la respuesta a ionomicina. Finalmente estudiamos si los estrógenos del ciclo estral desensibilizaban la movilización de [Ca++]i inducida por AII (10-7 a 10-10 M) o por TRH (10-8M). Observamos que no había diferencias al efecto de AII en células provenientes de ratas en diestro, proestro o estro. Sin embargo en diestro, cuando los niveles de estrógenos son más bajos, la respuesta a TRH 10-8M era significativamente inferior en comparación al estro o proestro. Es decir que los estrógenos circulantes a lo largo del ciclo modulan la respuesta de TRH pero no la de AII.