Participación de proteínas tirosina kinasas en la movilización de calcio intracelular inducida por despolarización en células adenohipofisarias

VELA J, SUÁREZ CECILIA, BECÚ-VILLALOBOS D, DÍAZ-TORGA G

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

SAIC, SAI, SAFE, SAB, SAN, SAF

Las c¨¦lulas hipofisarias son excitables, tienen actividad el¨¦ctrica espont¨¢nea y expresan en membrana canales de calcio voltaje dependientes, preferentemente del tipo L. Ha sido ampliamente estudiado que la actividad de los canales de calcio tipo L puede ser regulada por diversas prote¨ªnas kinasas tales como PKA y PKC. Estas dos kinasas fosforilan residuos en ser y treo de las subunidades alfa y beta de estos canales. M¨¢s recientemente ha cobrado inter¨¦s la participaci¨®n de tirosina kinasas (TK) y receptores TK (RTK) en la regulaci¨®n de canales de membrana voltaje dependientes en diversos tejidos, pero poco se sabe acerca de su participaci¨®n en la movilizaci¨®n de calcio en c¨¦lulas hipofisarias y ¨¦ste es el objetivo de nuestro trabajo. Se midi¨® segundo a segundo el calcio intracelular por espectrofluorimetr¨ªa (m¨¦todo de Fura-2AM), en c¨¦lulas adenohipofisarias en suspensi¨®n. Tanto la geniste¨ªna como la herbimicina (inhibidores de TKs) inhibieron significativamente la entrada de calcio extracelular inducida por una concentraci¨®n depolarizante de K+ 12.5mM (¨¢rea bajo la curva: genist 25uM: 5170¡À166, herbim 10uM: 4616¡À67 vs buffer: 6121¡À308, p<0.01). El est¨ªmulo de RTKs con los factores de crecimiento IGF, EGF, VEGF, FGF2 y TGF¦Â no modific¨® la [Ca++]i basal ni el influjo de calcio inducido por potasio. El ¨¢cido okadaico, un inhibidor de fosfatasas tipo I y IIa, no modific¨® el influjo de calcio por despolarizaci¨®n de membrana. Estos resultados demuestran por primera vez la participaci¨®n de TKs, probablemente no receptoras, en la activaci¨®n de canales de membrana voltaje dependientes en c¨¦lulas adenohipofisarias.