PRODUCCIÓN DE UN NUEVO AGENTE TERAPÉUTICO BASADO EN LA HIPERGLICOSILACIÓN DE hIFN-ALFA2b EMPLEANDO HUÉSPEDES CELULARES DERIVADOS DE MAMÍFEROS

GUGLIOTTA, AGUSTINA; RAUD, BRENDA; OGGERO, MARCOS; ETCHEVERRIGARAY, MARINA; KRATJE, RICARDO; CEAGLIO, NATALIA

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica. Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2015

Sociedad Argentina de Investigación Clínica. Sociedad Argentina de Fisiología

El interferón alfa humano recombinante (rhIFN-a) producido en bacterias es ampliamente utilizado como agente terapéutico para el tratamiento de diferentes enfermedades virales y tumorales. Sin embargo, sus características fisicoquímicas determinan la necesidad de su administración en dosis elevadas y frecuentes para alcanzar la ventana terapéutica. Para mejorar sus propiedades farmacocinéticas, se produjo una variante hiperglicosilada del hIFN-a2b (IFN4N) que posee 4 sitios ocupados por N-glicanos y que se caracteriza por presentar una masa molecular y densidad de carga superiores al hIFN-a2b no glicosilado. La abundante presencia de glúcidos unidos al IFN4N permitió mejorar notablemente sus propiedades farmacocinéticas, lo cual se tradujo en una mejora de su actividad antitumoral in vivo en ratones. Dado que el IFN4N producido en células de hámster (CHO-K1) exhibió estructuras glicosídicas antigénicas para humanos que pueden afectar su desempeño como agente terapéutico, se seleccionaron las células humanas HEK293 para comparar la calidad de la glicoproteína producida. De este modo, el IFN4NCHO presentó una masa molecular y contenido de ácido siálico superiores al IFN4NHEK, confirmándose además la presencia de estructuras antigénicas. El análisis de glicanos cargados evidenció mayor contenido de estructuras neutras para el IFN4NHEK mientras que predominaron las estructuras cargadas para el IFN4NCHO. Los ensayos de actividad biológica antiproliferativa in vitro demostraron mayor actividad biológica específica para la variante FN4NHEK, mientras que estudios de farmacocinética revelaron mejores propiedades para la variante IFN4NCHO. En conclusión, una misma modificación postraduccional como la glicosilación generó propiedades diferentes a pesar de expresar la misma molécula en huéspedes derivados de mamíferos. Finalmente, la selección del mejor candidato terapéutico requerirá de posteriores ensayos biológicos a realizarse in vivo.