Inmunolocalización de aromatasa cerebral utilizando un anticuerpo especifico en pejerrey (Odontesthes bonariensis).

PÉREZ, MR; KAH, O; SOMOZA, GM

San Juan

Congreso; II Reunión Conjunta de las Sociedades Argentinas de Biología.; 2011

Sociedad Argentina de Biología. Sociedad de Biología de Cuyo. Sociedad de Biología de Córdoba

El cerebro de peces teleósteos se distingue por su elevada expresión y actividad de aromatasa, enzima responsable de la síntesis de estrógenos. Su expresión ha sido relacionada con la proliferación y diferenciación neuronal que presentan los peces durante la vida adulta. En peces, se ha demostrado la existencia de dos variantes para esta enzima, denominadas P450aromA, de expresión gonadal y P450aromB, de expresión cerebral, restringida a las células gliales radiales (CGRs) que actúan como progenitores neuronales y que se conservan en adultos. En el pejerrey, han podido detectarse CGRs inmunoreactivas a P450aromB en el telencéfalo ventral y el área preóptica, utilizado un anticuerpo heterólogo. En comparación con otros teleósteos, esta expresión restringida podría deberse a que este anticuerpo podría no revelar aquellas células en las cuales la expresión es baja. En este marco, el objetivo de este trabajo fue producir una proteína recombínate para P450aromB de pejerrey y generar un anticuerpo específico contra ella. Para lo cual, se insertó un fragmento seleccionado del cDNA codificante para P450aromB de pejerrey en el vector de expresión pGEX-5X-3, induciéndose la expresión de la proteína recombinante fusionada a glutatión S-transferasa de Schistosoma japonicum. Esta proteína fue purificada y eluida en Glutathione Sepharose 4B. El anticuerpo se obtuvo a partir de la inmunización de un conejo con la proteína producida. Su especificidad fue evaluada por Western Blot. Los resultados obtenidos mediante inmunohistoquímica utilizando el anticuerpo específico confirman los resultados previos (Strobl-Mazzulla et al. 2005). Las células inmunorreactivas a P450aromB presentan características morfológicas de CGRs y expresan BLBP (proteína de unión lipídica de cerebro), marcador de CGRs. Estas células se detectaron en áreas periventriculares de telencéfalo ventral y área preóptica. Sin embargo no se detectaron CGRs inmunorreactivas a P450aromB en regiones periventriculares del tálamo o recesos hipotalámicos, zonas en donde se ha descripto proliferación celular en esta especie.Strobl-Mazzulla PH, Moncaut NP, López GC, Miranda LA, Canario AV, Somoza GM. 2005. Gen Comp Endocrinol. 143:21-32.