RESISTENCIA A LA TERAPIA FOTODINAMICA EN CELULAS TRANSFECTADAS CON EL ONCOGEN H-RAS

RODRIGUEZ L; DI VENOSA G; SCHICKINGER S; BATLLE A; MACROBERT A; CASAS A

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La Terapia Fotodinámica (TFD) es un tratamiento antineoplásico que se basa en la acumulación preferencial de un fotosensibilizante (FS) en el tejido maligno luego de su administración.  La iluminación con una luz de longitud de onda adecuada, da lugar a una reacción fotoquímica que produce la destrucción selectiva del tejido tumoral.  El objetivo del presente trabajo es comparar la eficiencia de la TFD con FSs de distinta localización subcelular sobre un par de líneas celulares tumoral/normal. Para ello se emplearon células HB4a de epitelio luminar mamario normal y su derivada transfectada con el oncogen H-Ras (VAL/12 Ras). Se emplearon los siguientes FSs: Verteporfirina, bis(dimetil-1-amino)-naranja de acridina, Foscan, Fotofrin y Merocianina 540.  Se cuantificó la acumulación de los 5 FSs en ambas líneas y además se observó la localización subcelular por microscopía confocal. Luego de poner a punto las condiciones de tiempos de incubación y concentraciones óptimas, se llevó a cabo la TDF con cada FS. Se observó que empleándose dosis de FS tales que indujeran igual concentración intracelular en ambas líneas, las dosis letales de luz para matar el 50% de las células son: para Verteporfirina, HB4a: 1±0,1 min, HB4a-Ras: 2±0,2 min (p=0,001); Naranja de acridina, HB4a:3± 0,2 min, HB4a-Ras: 4,2±0,5 min (p=0.004); Foscan, HB4a: 4,3±0,5 min, HB4a-Ras: 4,6±0,3 min (n.s.); Fotofrin, HB4a: 4,6±0,4 min, HB4a-Ras: 7,8±0,8 min (p=0,004) y Merocianina 540, HB4a: 15±1,8 min, HB4a-Ras: 21,5±2 min (p=0,003).  Esto muestra que las células transfectadas con Ras aumentan significativamente su resistencia al tratamiento fotodinámico con todos los FS excepto Foscan. De estos resultados se puede concluir que el oncogen H-Ras confiere resistencia a la TFD independientemente del FS. Se cree que están involucradas señales de supervivencia que son comunes a ambos tratamientos.