Diferenciação Cromossômica em espécies do grupo Hypsiboas semilineatus (Hylidae: Cophomantini)

PABLO SUÁREZ; ANDERSON GOMES; CLEUSA Y. NAGAMACHI; JÚLIO C. PIECZARKA

Campinas

Workshop; Workshop - Anfíbios Uma abordagem cromossômica e molecular; 2009

UNICAMP

O grupo de espécies de Hypsiboas semilineatus é atualmente composto por seis espécies amplamente distribuídas na América do Sul. Dados citogenéticos do grupo são escassos e restritos apenas a duas espécies. Os padrões de distribuição de heterocromatina são desconhecidos em todas as espécies do grupo. No presente estudo são apresentados comparativamente dados das constituições cariotípicas, padrões de bandeamento C, CMA3 e DAPI de três espécies de Hypsiboas do grupo semilineatus (H. boans, H. geographicus e H. wavrini). A localização das regiões organizadoras de nucléolos (NOR) foi determinada pela técnica de impregnação com prata e confirmada através de reações de FISH com sondas de rDNA 18S. As preparações cromossômicas foram obtidas a partir de medula óssea, testículos e intestino. Os resultados obtidos em todas as espécies analisadas concordam com os dados levantados da literatura, apresentando um número diplóide (2n) composto por 24 cromossomos e número fundamental de braços autossômicos (NF) de 48. Em espécimes de H. boans foi possível identificar um claro heteromorfismo no par cromossômico número oito. Embora as espécies analisadas apresentem cariótipos muito semelhantes, existe uma nítida diferenciação cromossômica evidenciada nos padrões de distribuição de heterocromatina observados em cada espécie. Todas as espécies apresentaram blocos heterocromáticos em todos os centrômeros dos cromossomos do complemento. Em H. boans e H. geographicus esse padrão inclui também blocos heterocromáticos intersticiais distribuídos diferencialmente no complemento cromossômico de cada uma delas. Em H. wavrini não foram observadas marcações intersticiais. O emprego de fluorocromos (DAPI/CMA3) revela que a heterocromatina presente no complemento das três espécies analisadas é rica em bases AT. Todos os espécimes estudados apresentaram apenas um único par cromossômico portador da NOR, cuja localização foi sempre coincidente com as constrições secundarias (CS) observadas. Em H. boans e H. geographicus a localização deste par na posição 7q é coincidente com o descrito na literatura para H. semilineatus, e encontram-se flanqueadas por blocos heterocromáticos ricos em bases AT. Já nos espécimes analisados de H. wavrini, as NORs foram observadas no par 9, não apresentando blocos heterocromáticos associados. Essas localizações de RON foram confirmadas em experiências de FISH. Heteromorfismos no tamanho das NORs foram detectados em todas as espécies analisadas, os mesmos sendo visualizados através das duas metodologias empregadas para revelar estas regiões. A similaridade do padrão cariotípico apóia a coesão do grupo, porém cada espécie apresenta características próprias, quando consideramos a distribuição de heterocromatina e localização das NORs.  A ausência de dados referentes a estes dois últimos aspectos citológicos nas demais espécies que compõem o clado, impossibilitam a elaboração de hipóteses mais apuradas sobre a evolução cromossômica no grupo de H. semilineatus.