CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

La hormona liberadora de gonadotrofinas (GnRH), ha sido involucrada en los mecanismos asociados a la apoptosis en el ovario de los mamíferos en relación con los procesos de foliculogénesis, atresia folicular y luteólisis. Los efectos de agonistas/antagonistas de GnRH sobre células luteales de bovinos no se han explorado. El objetivo del trabajo es evaluar los efectos del Acetato de Leuprolide (LA - GnRH agonista) y del Antide (ANT - GnRH antagonista) en la modulación de la apoptosis en cultivos primarios de células del cuerpo lúteo bovino. Se recolectaron ovarios bovinos de animales de faena y se aislaron los cuerpos lúteos. Se dispersaron las células luteales por tratamiento mecánico y enzimático (tripsina 0.25%), que fueron sembradas 1x 105/pocillo y mantenidas en cultivo durante 7 días con DMEM + F12 suplementado y SFB 10%. La tinción de oil red fue aplicada para detectar las vacuolas lipídicas que caracterizan las células esteroidogénicas luteales. Los tratamientos por triplicado en cada experimento de 24 y 48 hs. fueron: SFB 5 % (Control), ANT 100 nM, LA 110-100 nM, LA 110-100 nM + ANT 100 nM. Se realizó el recuento de cuerpos apoptóticos de cada tratamiento siguiendo criterios morfológicos mediante tinción con hematoxilina de Mayer. Para la captura de imágenes se usó Software IM50 (Leica). Los datos fueron analizados estadísticamente mediante ANOVA de dos vías y test de Bonferroni (p ≤ 0.05). Los resultados obtenidos indican aumento de células en apoptosis en relación a las dosis del LA, sin diferencias estadísticas significativas con tratamientos de 24 horas mientras que LA en dosis crecientes (1-10-100 nM) en los cultivos tratados durante 48 hs produjo aumento en el porcentaje de cuerpos apoptóticos respecto del control indicando diferencias significativas (p=0,0048) con la dosis 100 nM. ANT parece comportarse como antagonista parcial ya que no anuló totalmente el efecto inductor de LA en todas las dosis, en los tratamientos con ANT aumentó el porcentaje de cuerpos apoptóticos respecto del control. Se concluye que el LA es inductor de apoptosis de manera dosis dependiente en células luteales bovinas en cultivos primarios estimuladas durante 48 hs, resultando parcialmente bloqueado este efecto por el antagonista ANT en dosis 100 nM.

enviar mensaje