IBIMOL   23987
INSTITUTO DE BIOQUIMICA Y MEDICINA MOLECULAR PROFESOR ALBERTO BOVERIS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Fluidez de membrana en espermatozoides de cerdo incubados en presencia de la fracción soluble de la yema de huevo
Autor/es:
HUALA JM; ORREGO MT; MONTENEGRO BRUSOTTI J.; MARTÍNEZ SARRASAGUE M; SUHEVIC J; PIEHL L. L.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Jornada; IV Jornadas Internacionales del Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal - INITRA; 2014
Institución organizadora:
INITRA. Facultad de Ciencias Veterinarias, UBA
Resumen:
Durante el proceso de criopreservación de espermatozoides ocurren cambios semejantes a la capacitación espermática, proceso conocido como criocapacitación. La yema de huevo, aditivo usado en criopreservación, presenta una importante fracción proteica insoluble aún en presencia del detergente Equex-Paste® (EQ). Esta fracción mostró un efecto deletéreo sobre los espermatozoides y además dificultó las evaluaciones de proteínas fosforiladas en tirosina por Western blot y de fluidez de membrana mediante Resonancia de Espín Electrónico (ESR). Por estas razones y dado que la mayor parte de los lípidos se encuentra en la fracción soluble de la yema, el objetivo de este trabajo fue analizar el efecto de esta fracción sobre los espermatozoides de cerdo, en ausencia y presencia de glicerol (G) y EQ.La yema de huevo fue preparada al 20 % (Y) en diluyente Androstar® Plus (D) y sus fracciones soluble (FSY) e insoluble (FIY) obtenidas por centrifugación (10000 g, 30 min). Las muestras de semen, diluídas en D, fueron estabilizadas 2 h a 17ºC, centrifugadas y los espermatozoides resuspendidos a cc = 1,5 x109 células/ml en: 1) D, 2) FSY, 3) FSY- G 3%, 4) FSY-G 3% - EQ 0,5-1,5%. La temperatura fue disminuida de 17 ºC a 5ºC en un intervalo de 2 h. Las células fueron lavadas 3 veces con D por centrifugación (2000 g, 5 min) y la fluidez de su membrana determinada por ESR utilizando dos marcadores de espín.En aquellas muestras de buena calidad seminal, los espermatozoides sometidos a los distintos tratamientos mantuvieron la fluidez de su membrana, motilidad, vitalidad y test hipoosmótico (HOS), mientras que en las muestras de mala calidad seminal se observó un significativo aumento de la fluidez (p