Apoptosis y anomalías nucleares en las ventanas de susceptibilidad embrionaria murina luego de la ingesta materna de alcohol

LETICIA PEREZ TITO; COLL ,T.A.; VENTUREIRA, MR; SOBARZO, C.M.A; CEBRAL E

Chascomus- Buenos Aires

Taller; Taller de Biología Celular y del Desarrollo.; 2014

Previamente vimos que la exposición perigestacional a alcohol produce retraso de diferenciación, reducción del crecimiento e incremento de anomalías morfológicas en embriones de preimplantación (día 4 de gestación, D4), en gastrulación (día 8, D8) y en organogénesis (día 10, D10). Desequilibrios en la expresión de metaloproteasas, de moléculas de adhesión, de factores pro-inflamatorios y en el estado oxidativo, vistos luego de la exposición a alcohol, dispararían anomalías en el patrón espacio-temporal de apoptosis embrionaria durante la ventana de sensibilidad gestacional llevando a arresto embrionario, baja viabilidad y defectos congénitos tempranos. En embriones expuestos de D4, D8 y D10, los objetivos fueron analizar: 1) la morfología nuclear; 2) el índice de apoptosis por estadio y tejido embrionario; 3) el patrón temporal de inducción de apoptosis embrionaria. Hembras de ratón fueron tratadas (HT) con 10% de etanol, en agua de bebida, 17 días previos a la fecundación y hasta el día 4 (HT-D4), 8 (HT-D8) o 10 (HT-D10) de gestación vs hembras controles (agua, HC). En las HT-D4 vs HC, se elevó el % de blastocistos anormales (p<0,05), los núcleos picnóticos (técnica de Tarkowski) (p<0,001) y el Nro. de células TUNEL+ en blastocistos iniciales y expandidos vs las HC (p<0,05; p<0,01 ).En las HT-D8, el ectodermo embrionario, y no el mesodermo, presentó núcleos irregulares y fragmentados y alta apoptosis. En las HT-D10, junto con defectos nucleares, aumentó la apoptosis en mesodermo (p<0,05). Relativizando al control de cada estadio, los embriones de HT-D8 tuvieron la mayor apoptosis (9,4%) mientras que los blastocistos iniciales la menor (1,4%). La ingesta periconcepcional de alcohol induce anomalías nucleares y apoptosis desde el D4 comprometiendo el desarrollo nuclear de embriones organogénicos. La elevada apoptosis en ectodermo embrionario de D8 sugiere una alta tasa de eliminación de células, posiblemente dañadas por la exposición a alcohol, que evitaría un aumento de apoptosis en ectodermo neural de embriones de D10. Sin embargo, la exposición a alcohol entre D8 y D10 incrementó la apoptosis en mesodermo, lo que podría relacionarse con los defectos embriofetales encontrados recientemente en nuestro modelo.