INVESTIGADORES
LOMBARDO Daniel Marcelo
congresos y reuniones científicas
Título:
Los espermatozoides de animales knockout para la proteina CRISP2 presentan alteraciones en la motilidad y capacidad fertilizante
Autor/es:
BRUKMAN, NICOLÁS; DA ROS, VANINA; TORRES, PABLO; CISALE, HUMBERTO; LOMBARDO, DANIEL; IKAWA, MASAITO; OKABE, MASARU; CUASNICÚ, PATRICIA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LIX REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LXII REUNIÓN ANUAL Sociedad Argentina de Inmunología; 2014
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Sociedad Argentina de Inmunología
Resumen:
La proteína testicular CRISP2 (Cysteine-Rich Secretory Protein
2) se encuentra presente en el acrosoma y la cola de los espermatozoides
de mamíferos y participa en el proceso de fertilización.
El estudio de animales knockout (KO) para el gen crisp2 mostró
que cuando los machos KO eran puestos en apareo con hembras
superovuladas, el porcentaje de ovocitos fertilizados recuperados
del oviducto al día siguiente del apareo (%F) era significativamente
menor que el de los machos control (heterocigotas, HT).
En base a ello, el objetivo del presente trabajo fue analizar más
profundamente el fenotipo reproductivo de estos animales. Para
ello, machos KO o HT fueron colocados en apareo durante una
noche con hembras en estro natural (en vez de superovuladas),
analizándose el%F. Bajo estas condiciones, el%F de los machos
KO y HT no fueron significativamente diferentes. Sin embargo, al
emplear hembras tanto superovuladas como en estro, el%F de
los machos KO disminuyó en forma significativa en función del
número de ovocitos ovulados, sin observarse diferencias para los
HT. Ensayos de fertilización in vitro utilizando ovocitos con cumulus
oophurus (CO), sin CO y con zona pellucida (ZP) y sin CO
ni ZP, mostraron, en todos los casos, porcentajes de fertilización
significativamente menores para los espermatozoides KO que HT.
Asimismo, los espermatozoides KO mostraron una menor capacidad
de penetrar el CO sin evidenciar diferencias en su capacidad
de unirse a la ZP respecto a los controles. Finalmente, el análisis
de la motilidad por CASA (Computer Assisted Sperm Analysis)
reveló que los espermatozoides KO presentaban alteraciones en
varios parámetros cinéticos (VAP, VSL, VCL y ALH) asociados
a hiperactividad, motilidad vigorosa necesaria para penetrar las
envolturas del ovocito. En conjunto, los resultados obtenidos
tanto in vivo como in vitro indican que CRISP2 participaría en el
proceso de fertilización a través de su capacidad de regular la
hiperactividad de los espermatozoides.