La metformina inhibe la viabilidad de Echinococcus granulosus mediante aumento de la autofagía.

JULIA A. LOOS; ANDREA C. CUMINO

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XXV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2012

En células de mamífero y levaduras, la interrupción de la señalización dependiente de TOR por rapamicina induce autofagia. Por otro lado, ante la activación de AMPK y posterior fosforilación de raptor se inhibe a TOR, y también se espera estimulación la autofagia. Esta vía de señalización, conservada en metazoos, se desconoce en el parásito cestode Echinococcus granulosus (Eg), agente causal de la hidatidosis humana. La metformina, droga hipoglucemiante y antineoplásica, ejerce su efecto farmacológico a través de la activación de la AMPK. Para examinar el rol de AMPK en el control de la autofagia en Eg, se estudió el efecto de la metformina sobre la viabilidad de protoescólices (PTS) y quistes. La droga redujo la viabilidad de los PTS en forma dosis-dependiente e indujo un efecto deletéreo sobre la membrana germinativa de los quistes, determinado mediante MEB. La metformina también incrementó el nivel de vesículas acídicas (detectado por tinción con naranja de acridina y microscopía confocal), determinó la presencia de autofagosomas (detectada por MET) y aumentó la expresión de LC3II (confirmado por inmunoblot) en PTS tratados. Además, se analizó la expresión de genes reguladores y estructurales involucrados en la formación de autofagolisosomas descriptos en Eg (atg6, atg8, atg9, atg12, atg16 y atg18). Previamente en el laboratorio se reportó la existencia de TOR y la inducción de autofagia por rapamicina en Eg. En base a ello se identificó Eg-raptor (contig pathogen_ EgG_scaffold_0006, ORF de 1147 aminoácidos y los dominios característicos de la proteína) que mostró 42% y 37% de identidad y 57% y 52% de homología con los ortólogos Homo sapiens (BAH12314) y Ascaris suum (ADY40316), respectivamente. Estos resultados revelan que la inducción de autofagia por metformina podría estar relacionada con su capacidad de activar a la AMPK. Además, la sensibilidad a estas dos drogas y los resultados bioinformáticos podrían sugerir la presencia del complejo TORC1 en Eg.