PARTICIPACIÓN DE LA VÍA DE SEÑALIZACIÓN PI3K/AKT EN LA MODULACIÓN DE LA PROLIFERACIÓN POR ATP EN CÉLULAS OSTEOBLÁSTICAS Y TUMORALES MAMARIAS

SCODELARO BILBAO, PAOLA GABRIELA; KATZ SEBASTIÁN,; BOLAND, RICARDO; SANTILLÁN GRACIELA

Bahía Blanca

Jornada; Primeras Jornadas Bioquímicas del Sudoeste Bonaerense; 2009

Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia - UNS

La vía de señalización de la fosfatidil inositol 3-quinasa (PI3K)/Akt ha sido implicada en la regulación de la proliferación celular y oncogénesis. Previamente, demostramos que la estimulación de receptores P2Y2/4 por ATP induce la fosforilación de Akt en serina 473 en forma dependiente de PI3K en células osteoblásticas ROS 17/2.8 y tumorales mamarias MCF-7. En estas últimas, la activación de Akt por ATP fue, además, dependiente de Src y PKC e independiente del influjo de Ca2+. En este trabajo se estudió la modulación de la vía PI3K/Akt por ATP en células ROS 17/2.8 y su contribución a la proliferación celular en ambas líneas celulares. Mediante análisis de Western blot se observó que el uso de PP1, un inhibidor de Src, disminuyó la activación de Akt inducida por ATP en células ROS 17/2.8. La incubación de las células en un medio libre de Ca2+ (+EGTA 0,5 mM) inhibió el efecto del ATP sobre la activación de Akt, mientras que nifedipina y verapamil, inhibidores de canales VDCC ó Ro318220, un inhibidor de PKC, no lograron disminuir dicho efecto. El empleo de Ly294002 y wortmanina, inhibidores de PI3K, sugiere que la fosforilación de las MAPKs ERK1/2, p38 y p46 JNK por ATP es independiente de PI3K. Ensayos de viabilidad celular (MTS) demostraron que ATP y UTP incrementaron la viabilidad celular luego de 24hs en ambas líneas celulares, mientras que Ly294002 y wortmanina,  disminuyeron dicho efecto. Estos resultados sugieren que, al igual en células MCF-7, la activación de Akt es dependiente de PI3K como de Src. En células ROS 17/2.8, se evidenció que el influjo de Ca2+ a través de canales distintos a VDCC modula la activación de Akt. PKC no participaría en la activación de Akt por ATP. En ambos tipos celulares, la vía PI3K/Akt participaría en los efectos mitogénicos inducidos por ATP.