Respuestas de defensa inducidas por un fosfolipido extracelular en suspensiones celulares de tomate

GONORAZKY, A. G.; LAXALT, A.M.; DE LA CANAL, L

Chascomús

Congreso; SAFV; 2006

Respuestas de defensa inducidas por un fosfolípido extracelular en suspensiones celulares de tomate Gonorazky, AG; Laxalt, AM; Munnik, T(a) y de la Canal, L. IIB, Universidad Nacional de Mar del Plata, CC. 1245, 7600 Mar del Plata. E-mail: gonorazk@mdp.edu.ar (a)Department of Plant Physiology, SILS, UvA, The Netherlands Las plantas se encuentran expuestas en forma constante al ataque de microorganismos patógenos contra los que han desarrollado distintos mecanismos de defensa, uno de los cuales es la Resistencia Sistémica Adquirida (SAR). Se ha reportado una lipid transfer protein (LTP) de Arabidopsis que participa en la inducción de SAR al transmitir o translocar a través del fluido del floema una señal móvil desde el tejido infectado hacia órganos distales de la planta (Maldonado et al 2002). Hasta el momento dicha señal no ha sido identificada, pero una de las hipótesis planteadas propone que ésta podría ser una molécula lipídica. En nuestro laboratorio hemos identificado un perfil diferencial de fosfolípidos (Fls) en el medio extracelular de suspensiones celulares de tomate, siendo el fosfatidilinositolfosfato (PIP) el Fl más abundante. Asimismo demostramos que los niveles de PIP se incrementan en forma tiempo y dosis dependiente frente al tratamiento de las células con un inductor fúngico. Por otra parte, la adición exógena de PIP en suspensiones de células de tomate indujo respuestas de defensa típicas como la producción de especies reactivas de óxigeno y muerte celular. El objetivo de este trabajo fue analizar, en primer lugar, la participación de PIP en otros tipos de respuestas de defensa. Mediante el tratamiento de células de tomate durante distintos tiempos con dos concentraciones de PIP, se pudo determinar que este Fl induce en forma tiempo y dosis dependiente la producción de peróxido de hidrógeno (detectado y cuantificado en forma específica) y la expresión de genes de defensa tales como HSR, PAL, ACC oxidasa, PLDβ1 y PR1. Finalmente, se analizó si PIP podría encontrarse en el medio extracelular en forma soluble o bien formando parte de partículas extracelulares. Para ello, medio extracelular de células de tomate premarcadas con [32P]-ortofosfato fue sometido a centrifugación diferencial. Los lipidos totales fueron extraidos de las distintas fracciones obtenidas y posteriormente resueltos mediante cromatografía de capa delgada. De esta manera se determinó que PIP puede ser precipitado, sin detectarse marca en el sobrenadante. Estos resultados indican que el PIP extracelular es una molécula involucrada en la inducción de respuestas de defensa en plantas que participaría en vías de señalización aun no identificadas.