INVESTIGADORES
GARRIDO Mariano Enrique
congresos y reuniones científicas
Título:
DETERMINACIÓN ENZIMÁTICA DE LEVODOPA Y CARBIDOPA EN FARMACOS UTILIZANDO CALIBRACIÓN MULTIVARIADA CON DATOS ESPECTRALES DE SEGUNDO ORDEN
Autor/es:
MARCOS GRÜNHUT; MARIANO GARRIDO; MARÍA E. CENTURIÓN; BEATRIZ S. FERNÁNDEZ BAND
Lugar:
Bahía Blanca
Reunión:
Congreso; V Congreso Argentino de Química Analítica; 2009
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Químicos Analíticos
Resumen:
Levodopa (LVD) y carbidopa (CBD) son dos principios activos utilizados en
conjunto para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson [1]. La determinación
cuantitativa de estos compuestos en preparaciones farmacéuticas comerciales resulta
muy interesante dado que los mismos se encuentran juntos y en altas relaciones de
concentración: 250/25, 200/50 y 100/25 mg de LVD/CBD, respectivamente. Los
métodos oficiales para llevar a cabo su cuantificación suelen emplear cromatografía
líquida de alta presión (HPLC). Sin embargo, se han propuesto numerosos métodos
alternativos, los cuales utilizan técnicas como espectrofotometría UV-Vis e IR asistida
por quimiometría, voltamperometría, potenciometría, electroforesis capilar y
fluorescencia sincrónica, entres otras. También, dado que LVD y CBD son sustratos de
la enzima Polifenol oxidasa (PFO; EC 1.14.18.1), se ha propuesto un método
enzimático con detección espectrofotométrica. En dicho trabajo, se han aplicado
distintos métodos de calibración multivariada (PLS, SPA-MLR) para resolver la
superposición espectral existente [2]. Sin embargo, no han sido propuestos hasta el
momento trabajos que utilicen datos de segundo orden.
El objetivo del presente trabajo fue el desarrollo de un método enzimático de flujo
continuo con detección espectrofotométrica para la determinación simultánea de LVD y
CBD en fármacos utilizando datos espectrales de segundo orden. El método se basa en
la oxidación de ambos analitos catalizada por la enzima PFO en medio de solución
reguladora de fosfato de pH 7,0. Las matrices de datos de tres vías fueron generadas
registrando los espectros UV-Vis (entre 288 y 600 nm) en función del tiempo para las
distintas reacciones que involucran las mezclas de LVD/CBD con PFO,
correspondientes al diseño experimental planteado y a las muestras de medicamento.
Con estas matrices se construyeron cubos de datos, los cuales fueron estudiados
mediante Análisis Paralelo del Factor (PARAFAC) de tres vías, utilizando la restricción
de no-negatividad en los tres modos (espectros, concentración y perfil cinético). El valor
de core consistency obtenido fue de 77 %, el porcentaje de varianza explicada 99,8 % y
el error global de predicción del modelo 1,45 %. Los valores de concentración
obtenidos para las muestras fueron contrastados con aquellos obtenidos por el método
de referencia (HPLC) [3], no encontrándose diferencias significativas (α = 5 %).
el error global de predicción del modelo 1,45 %. Los valores de concentración
obtenidos para las muestras fueron contrastados con aquellos obtenidos por el método
de referencia (HPLC) [3], no encontrándose diferencias significativas (α = 5 %).
core consistency obtenido fue de 77 %, el porcentaje de varianza explicada 99,8 % y
el error global de predicción del modelo 1,45 %. Los valores de concentración
obtenidos para las muestras fueron contrastados con aquellos obtenidos por el método
de referencia (HPLC) [3], no encontrándose diferencias significativas (α = 5 %).
α = 5 %).