INVESTIGADORES
CASAS Adriana Gabriela
congresos y reuniones científicas
Título:
Fotosensibilización selectiva de bacterias internalizadas en queratinocitos
Autor/es:
MAMONE L; VALLECORSA P.; CALVO G.; DI VENOSA G; TARSIA F.; BUZZOLA F; CASAS A
Reunión:
Congreso; 15vo Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas; 2014
Resumen:
La terapia
fotodinámica (TFD) es un tratamiento que implica la eliminación de células
patógenas a partir de la administración de un compuesto fotosensibilizante (FS)
capaz de producir diferentes especies reactivas, luego de ser activado con luz.
Esta técnica puede aplicarse en la eliminación de microorganismos involucrados
en infecciones. Recientemente, nuestro grupo ha encontrado extractos vegetales
con actividad FS sobre bacterias. Nuestro objetivo fue conseguir la eliminación
selectiva de las bacterias aplicando TFD empleando como fotosensibilizante un
extracto vegetal asilado por nosotros.
MATERIALES Y
METODOS:
Establecimos un
modelo in vitro de infección
bacteriana, utilizando las especies S.
epidermidis y S. aureus para
infectar una línea de queratinocitos murinos (PAM212) creciendo en monocapa.
Luego de infectar, tratamos los queratinocitos con TFD, iluminando con luz
visible, y empleando como FSs el extracto vegetal de flor de la especie Solanum verbascifolium y azul de
Toluidina (FS de origen sintético de uso clínico). Finalmente evaluamos luego
de la TFD, la
viabilidad bacteriana por recuento de unidades formadoras de colonias y de los
queratinocitos por el ensayo de MTT.
RESULTADOS:
Al emplear el
extracto de S. verbascifolium como
FS, observamos selectividad del tratamiento por los microorganismos. Luego de 2
hs de iluminación, se obtuvieron reducciones en el recuento de UFC/ml de S. epidermidis y S. aureus superiores al 90%, respecto al control sin irradiar (p<0,05),
siendo ambas especies bacterianas más sensibles a la TFD que los queratinocitos
(15% de reducción de la viabilidad respecto al control). Por el contrario, al
emplear como FS el azul de Toluidina, la viabilidad de los queratinocitos se
redujo fuertemente (85% respecto al control en oscuridad), mientras que las
UFC/ml se redujeron sólo en un 35%. Se tomó como indicador de selectividad, el
índice de bacterias/queratinocito viable. Luego de 2 hs de iluminación en
presencia del extracto, este estimador se redujo desde 40 ± 6 (índice
inicial) a 2 ±
6 y 6 ± 6 en S. epidermidis y S. aureus,
respectivamente.
Mientras que con el azul de Toluidina, el número de bacterias por queratinocito
viable se incrementó (115 ± 6 en S. epidermidis y 104 ± 6 en S. aureus).