INVESTIGADORES
ZWIRNER Norberto Walter
congresos y reuniones científicas
Título:
La actividad del receptor de glucocorticoides requiere la activación de p38 MAPK
Autor/es:
RUBIO, MARÍA FERNANDA; FRANCO, DIANA LORENA; PANELO, LAURA; ZWIRNER, NORBERTO WALTER; COSO, OMAR; COSTAS, MÓNICA ALEJANDRA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; 59a Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2014
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
Los Glucocorticoides (GC) son esenciales durante la respuesta anti-inflamatoria inducida por citoquinas. El Receptor de glucocorticoides (GR) es blanco de fosforilación, lo cual regula su actividad transcripcional. Demostramos previamente que los GC y la citoquina inflamatoria TNF activan fuertemente a p38MAPK, la cual fosforila al GR y al coactivador TIF2. El objetivo de este trabajo fue investigar el rol de p38 en la función regulatoria de citoquinas sobre GR. Para analizar el efecto de p38 sobre la actividad transcripcional de GR, células embrionarias de riñón humano (HEK293) fueron transfectadas con un plásmido reportero para GR (GRE-Luc) y estimuladas con Dexametasona (D 500nM) o D+T (T 0,02ng/ml). El estímulo simultaneo incrementa la respuesta de GR respecto Dex (7,3±0,2 vs 4,8±0,7 p<0,001). El inhibidor de p38 (SB203580 10μM), inhibe la actividad de GR, pero el efecto de T+D respecto de Dex se sigue observando (3,2±0,7 vs 1,5±0,6 p<0,001). La actividad de GR requiere de coactivadores, entre ellos TIF2, su sobreexpresión potencia el efecto de Dex y también de D+T (27,6±1,9 y 38,4±4,3, respectivamente), pero la adición de SB bloquea totalmente el efecto de TIF2 sobre la actividad de GR (D+SB 3,0±0,8 y T+D+SB 5,5±1,5). Para estudiar si la fosforilación de TIF2 puede afectar la actividad de GR, la serina 1323 potencial blanco de fosforilación fue mutada por una alanina, inactivando el sitio de fosforilación. Las células transfectadas con esta construcción estimuladas con Dex se comportan de manera similar a las que no sobreexpresan el coactivador. Por lo tanto, la activación de p38 constituye un paso crítico que regula la sensibilidad a GC. Estos resultados contribuyen a entender mejor los mecanismos moleculares de homeostasis que impiden una inflamación excesiva y podrían constituir una forma de prevenir el daño tisular.