- La Lumazina Sintetasa de Brucella abortus activa células dendríticas a través de TLR-4

BERGUER PAULA, MUNDIÑANO JULIANA, PIAZZON ISABEL Y GOLDBAUM FERNANDO

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:10.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} p.MsoBodyText, li.MsoBodyText, div.MsoBodyText {margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; text-align:justify; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; mso-bidi-font-size:10.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:ES-AR; layout-grid-mode:line;} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> La Lumazina Sintetasa de Brucella abortus (BLS) es una proteína altamente inmunogénica. Genera una fuerte respuesta humoral in vivo aun en ausencia de adyuvantes. Para estudiar las causas de su inmunogenicidad, se analizó el efecto de la interacción entre BLS y células dendríticas derivadas de médula ósea (BMDCs). Se cultivaron BMDCs de ratones BALB/c con a)BLS 5mM o b)PBS y 18hs después se analizó por citofluorometría la expresión de moléculas coestimulatorias. Se descartó que los efectos observados se debieran a contaminación con LPS, ya que se preincubó con polimixina B (PMB) soluble o PMB-agarosa. En las células incubadas con BLS, dentro de la subpoblación CD11c+ (75-85%) se observaron aumentos significativos en los porcentajes y fluorescencia media de células que expresan CD40, CD80, I-Ad y CD86. Los resultados se expresan como la media del porcentaje ± SD (n=3). Ejs: %CD86hi/CD11c+: (a)13.8±0.3; b)2.9±0.4, p<0.0001; %CD80hi/CD11c+: (a)36.9±0.5; b)19.3±1.8, p<0.0001. Al preincubar BLS con anticuerpos anti-BLS, los valores resultaron similares al control. Los receptores de tipo Toll (TLRs) están implicados en el reconocimiento de moléculas de origen microbiano por el sistema inmune innato y se expresan en BMDCs. En las BMDCs de ratones TLR2-/- se observaron aumentos significativos en los marcadores analizados, mientras que en ratones TLR4-/- y C.C3H tlr4lps-d no aumentó ninguno de ellos. Se comparó la producción de citoquinas por ELISA en BMCDs de ratones BALB/c incubadas 18hs con a)BLS y b)PBS usando PMB o PMB-agarosa. BLS indujo la producción de citoquinas IL-6, IL-12p70 y TNF-a. Los datos se expresan como la media ± SD (n=3) en pg/ml: Ej: TNF-a a)338.4±43.8; b)23.0±12.8;p<0.0002. Estos resultados muestran que BLS activa a las células dendríticas y que el TLR4 está involucrado en este proceso.