Expresión de las subunidades de la Na+, K+ ATPasa (NKA) renal luego de isquemia e isquemia-reperfusión

MOLINAS, SARA M.; TRUMPER, LAURA; SERRA, ESTEBAN; ELÍAS, M. MÓNICA

Rosario. Argentina

Congreso; XXIV Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2004

Sociedad de Biología de Rosario

EXPRESION DE LAS SUBUNIDADES DE LA Na+, K+ ATPasa (NKA) RENAL LUEGO DE ISQUEMIA E ISQUEMIA-REPERFUSION Molinas, Sara M.*; Trumper, Laura; Serra, Esteban #; Elías, M. Mónica E.* Area Farmacología. Facultad de Cs. Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario. * IFISE, #IBR CONICET XXIV Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario. 1 y 2 de diciembre de 2004. Rosario. Argentina. En trabajos previos, reportamos un aumento de la subunidad a de la NKA en riñones sometidos a 40 minutos de isquemia unilateral y este aumento se mantiene luego de 24 hs de reperfusión, tanto en corteza como en médula. La subunidad b de esta enzima no se modifica durante la isquemia pero disminuye su abundancia solo en la médula luego de 24 hs de reperfusión. Los riñones contralaterales (cl) no sufren modificaciones. Se estudió la expresión del mRNA de ambas subunidades. Se sometió a 4 ratas Wistar macho adultas a 40 minutos de isquemia unilateral sin reperfusión (I40) o seguidas de 24 hs de reperfusión (IR24), se extrajo el RNA de corteza y médula renal y se realizó RT-PCR. Los resultados se analizaron por ANOVA y Newman-Keuls. Se encontró aumentado el mRNA de la subunidad a a los 40 minutos de isquemia en corteza (mRNA suba/actina: Control: 0,9±0,04; I40: 1.18±0,03*, *p<0,05) y en médula (Control: 0,58±0,1; I40: 1,0±0,1*, *p<0,05), mientras que los niveles de mRNA de la subunidad b no cambiaron. Luego de 24 hs de reperfusión, el mRNA de la subunidad a retorna a los valores normales en corteza y médula, y los niveles de mRNA de la subunidad b disminuyen solo en médula (mRNA subb/actina: Control: 0,4±0,02; IR24: 0,2±0,003*, *p<0,05). Los riñones cl no presentaron cambios. Estos resultados evidencian una regulación independiente de la expresión de ambas subunidades de la NKA y ésta es diferente a lo largo de los distintos segmentos del nefrón. Debido a que se conoce que la angiotensina II (AGII) puede aumentar la expresión del mRNA de las subunidades de la NKA, se estudio también si la AGII se encuentra involucrada en la regulación de la expresión de la subunidad a de la NKA. Se trataron los animales con losartán (80mg/kg/día, n= 4), un antagonista de los receptores AT1 de la AGII, durante 3 días previos a realizar isquemia de 40 minutos sin reperfusión y se analizó la abundancia de la subunidad a por western blot en los riñones isquémicos. Esta subunidad continuó incrementada indicando que el aumento de su expresión no se encontraría mediado por AGII al menos en las condiciones utilizadas. Este trabajo ha sido enviado para su presentación en la XLIX reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica a realizarse los días 16 al 20 de noviembre de 2004 en Mar del Plata, Argentina.