INVESTIGADORES
MICHAUT Marcela Alejandra
congresos y reuniones científicas
Título:
DINÁMICA DE LA REACCIÓN CORTICAL EN TIEMPO REAL DE OVOCITOS DE RATÓN
Autor/es:
CAPPA, ANDREA I.; DE BLAS, GERARDO; DE PAOLA, M. MATILDE; MAYORGA, LUIS S.; MICHAUT, MARCELA A.
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La fecundación de un ovocito desencadena la exocitosis de los gránulos
corticales (GC), proceso conocido como reacción cortical (RC). Debido a la
falta de un marcador específico de GC, no se ha podido estudiar la cinética de
la RC. El objetivo de este trabajo fue estudiar la dinámica de la RC en tiempo
real en ovocitos activados partenogenéticamente y comparar su cinética entre
ovocitos ovulados (madurados in vivo)
y madurados in vitro. Para observar la
RC se utilizó la lectina Lens culinaris-FITC
para teñir el contenido de los GC secretado al espacio perivitelino. Los
ovocitos ovulados fueron obtenidos a partir de oviductos provenientes de
hembras estimuladas hormonalmente con PMSG y hCG. Para la maduración in vitro, los ovocitos fueron colectados a partir de ovarios de
hembras estimuladas con PMSG y madurados in
vitro en medio CZB durante 15 hs. Los ovocitos fueron montados en una
cámara conteniendo medio M2 libre de calcio y magnesio y activados
partenogenéticamente con cloruro de estroncio en presencia de la lectina. Las
imágenes fueron capturadas en un microscopio invertido acoplado con un sistema
de iluminación LED y una cámara de alta resolución. Se tomaron imágenes cada 1
min durante 1 h. Los resultados preliminares muestran que el 82% de los
ovocitos ovulados reaccionaron a los 10 min; por el contrario sólo el 50% de
los ovocitos madurados in vitro reaccionaron
recién a partir de los 25 min. Además, observamos que la cinética de la RC
transcurre de manera gradual y simultánea en los ovocitos ovulados, mientras que en los madurados in vitro ocurre de una manera abrupta y
asincrónica. En conclusión, la cinética de la RC en los ovocitos ovulados es
sincrónica y similar en tiempo a la fisiológica desencadenada por la
fecundación, mientras que en los ovocitos madurados in vitro es asincrónica y tardía. Nuestros resultados muestran por
primera vez la dinámica de la RC en tiempo real y revelan que las condiciones
de maduración afectan la cinética de la misma.