Fusariosis de la mazorca en el noroeste argentino: diagnosis molecular, diversidad de especies y potencial toxigenico

DICKER, A.F.; BELIZAN, M.M.E.; ARISTIMUÑO FICOSECO, M. E.; SAMPIETRO, D.A.

Corrientes

Congreso; XXI Jornadas de Jovenes Investigadores de la AUGM; 2013

Asociación de Universidades del Grupo Montevideo

Especies del genero Fusarium pertenecientes al complejo Gibberella fujikuroi (Gb) generan podredumbres de mazorca en maiz del Noroeste argentino. Entre ellas, son especialmente preocupantes Fusarium verticillioides y F. proliferatum porque ademas de reducir significativamente el rendimiento en granos, contaminan estos ultimos con fumonisinas. Es tas micotoxinas son capaces de provocar leucoencefalomalacia en equinos, edema pulmonar en cerdos, y cancer de higado en ratas. Estudios epidemiologicos demostraron que una mayor incidencia de cancer esofagico en poblaciones humanas localizadas en Sudafrica , Brasil, China e Italia esta conectada al consumo de maiz contaminado con altos niveles de fumonisinas. La identificacion confiable de las especies causantes de la fusariosis de la mazorca en un determinado ambito geografico es critica para poder inferir el riesgo micoroxigenico existente en el mismo. El reconocimiento de estas usualmente se efectua en base a caracteres morfologicos y biologicos, Sin embargo , los mismos muchas veces son insuficientes para la identificacion inequivoca de Fusarium hasta el nivel de especie. Deben incorporarse criterios complementarios de diagnostico. Se describieron varias tecnicas basadas en el usa de ADN fungico destinadas a la identificacion rapida, sensible y altamente especifica de especies producroras de fumonisinas, tales como la secuenciacion de determinados genes o reacciones en cadena de polimerasa (PCR). En este trabajo, se utilizaron en sayos de PCR (Fve, Fpr, Gib,Fum1, Mati y Mat2) y secuenciacion parcial del gen TEF-la (factor de elongacion de traducci6n 1 alfa) e IGS (espaciador intergenico de ADN ribosomico) en la identificación de especies de Fusarium causantes de podredumbres en mazorca en el noroeste argentino. Tambien se evaluo in vitro la capacidad productora de fumonisinas. A partir de mazorcas infectadas se aislaron y caracterizaron morfologicamente 31 aislados de Fusarium. Muestras de ADN de los mismos se utilizaron en ensayos de PCR con cebadores especificos para F. verticillioides y F. proliferatum basados en secuencias IGS y del gen Fum1 involucrado en la biosíntesis de fumonisinas. Tambien se secuenció un fragmento del gen TEF-1a y de la region IGS de los aislados, sometiendose las secuencias posteriormente a analisis de parsimonia. La caracterizacion morfologica indico que 14/ 31 de los aislados investigados pertenecieron a F. verticillioides,y 3/31 a F. proliferatum. Los ensayos Fve y Fpr confirmaron la identidad de estos aislados e indicaron que 6/ 31 y 4/ 31 no identificados morfologicamente eran F. verticillioides y F. proliferatum, respectivamente. Todos los aislados de F. verticillioides y F. proliferaturn presentaron una copia funcional del gen Fuml, y produccion de furnonisinas altarnente variable. El cociente Matl/Mat2 y la inconsistente subdivision en los arboles filogeneticos, sugiere una significativa recombinacion genetica tanto dentro de F. verticillioides como de F. proliferatum. Las secuencias de la region IGS y del gen TEF 1-alfa permitieron identificar los aislados remanentes no identificados morfologicamente (4/31) como F.sacchari (3/31) y F. subglutinans (1/31). Las tecnicas moleculares permitieron consistentemente confirmar la identidad de 55% de los aislados y asignar especie al 45% restante indefinido mediante el uso de criterios morfologicos. La acumulacion in vitro de fumonisinas sugirio que F.verticillioides y F. proliferarum presentan potenciales toxigenicos similares, siendo por consiguiente ambas especies un riesgo para la seguridad alimentaria del NOA.