Rol de la vía de la miosina en el efecto del anagrelide sobre el megacariocito.

ESPASANDIN YESICA R; GLEMBOTSKY AC; MARTA RF; LEV PR; GOETTE NP; MOLINAS FC; HELLER PG

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínica.

Los mecanismos por los cuales el anagrelide (A) disminuye las plaquetas en la Trombocitemia Esencial no son claros. Previamente demostramos que además de inhibir la megacariocitopoyesis, el A inhibe la fase final de producción plaquetaria o trombopoyesis, caracterizada por la formación de proplaquetas. Postulamos que el A activaría la vía de la miosina, uno de los pocos reguladores negativos que modula ambos procesos, lo cual explicaría la acción inhibitoria del A sobre los mismos. Estudiamos el efecto del inhibidor de miosina, blebistatina (B), en la acción del A sobre megacariocitos (MK) derivados de cordón umbilical. En la etapa de MKpoyesis, la B (días 7-10 de cultivo) indujo polilobulación en cultivos sin A y parcialmente en cultivos con A, MK estadío II+III (inmunofluorescencia con CD41 y Hoechst) en C, A, B y B+A, 8.9± 2.8, 6.9±3.8, 48.3±27.4, 26.8±10.4%, p=0.001 (p<0.05: A vs B), pero fue incapaz de inducir maduración en MK tratados con A, fluorescencia CD42b (citometría de flujo) en C, A, B y B+A, 56±2, 42.2±5.8, 70.8±10.5, 43.9±22.6, p>0.05, sugiriendo desacople entre maduración y poliploidización. El tratamiento de MK maduros (día 13) con B revirtió parcialmente la inhibición del A sobre la trombopoyesis, % proplaquetas (microscopio invertido) en C, A, B y B+A 2,1±0,9%, 0,86±0,2%, 4,81±0,4%, 2,57±0,07%, p<0,0001 (p<0.05: C/A, C/B, A/B, A/B+A). La incubación de MK maduros con A indujo fosforilación (Western blot) de la cadena regulatoria de miosina (MLC), que activa la miosina. En conclusión, el efecto inhibitorio del A sobre las proplaquetas se debe, al menos en parte, a activación del circuito inhibitorio pMLC/miosina, resaltando su importancia en la regulación de la trombopoyesis y ampliando el espectro de drogas que inhiben la producción plaquetaria por esta vía (ej: trombocitopenia secundaria a inhibidores HDAC). Respecto al efecto del A sobre la MKpoyesis, se requieren otros estudios para establecer el mecanismo subyacente a su acción en esta etapa.