Rol de la AQP8 mitocondrial (AQP8mt) hepática en la respuesta adaptativa a la acidosis

MOLINAS, SARA M.; LEANDRO SORIA; MARRONE JULIETA; LAURA TRUMPER; MARINELLI, RAÚL A.

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología y XLV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 2013

SAIC-SAFIS-SAFE

Diversos trabajos proponen que ante una acidosis, el hígado cambiaría de mecanismo predominante de detoxificación del NH4+: disminuyendo la síntesis de urea (proceso que consume bicarbonato) en mitocondrias de hepatocitos periportales y aumentando la producción de glutamina en el citosol de hepatocitos perivenosos. Estudios previos de nuestro laboratorio demostraron que AQP8mt hepática facilita la entrada de amoníaco a la mitocondria y su metabolización a urea vía ureagénesis, por lo cual hipotetizamos que esta proteína disminuye su expresión en respuesta a la acidosis, contribuyendo a la disminución de la ureagénesis. El objetivo fue evaluar el efecto de la acidosis sobre la ureagénesis y la expresión de AQP8mt hepática en distintos modelos experimentales. A ratas Wistar macho adultas se les administró NH4Cl 0,28M/sacarosa 2% (A7) o sacarosa 2% (C7) en el agua de bebida durante 7 días (n=6). Este modelo induce una acidosis metabólica (pH sanguíneo: C7=7,40±0,01; A7=7,33±0,01; p<0,05). Estudios de inmunobloting en mitocondrias aisladas de hígado mostraron que la expresión de AQP8mt disminuyó en A7 (-50%, p<0.05), coincidiendo con niveles menores de urea en homogenados hepáticos (-35%; p<0,05). Por otra parte, cultivos primarios de hepatocitos de rata se incubaron en medio de cultivo a pH 7,4 o pH 7,0 durante 40 h (n=6). Se utilizó medio de cultivo sin glutamina (fuente intramitocondrial de NH4+) y con el agregado de 1 mM NH4Cl con el fin de evaluar solo la formación de urea a partir de NH4+. Los hepatocitos incubados a pH 7,0 presentaron una disminución de AQP8mt (-30%, p<0,05) evaluada por inmunobloting, asociada a una menor ureagénesis (-35%, p<0,05) y mayor concentración de NH4+ (+29%, p<0,05) en el medio de cultivo. La viabilidad celular no se encontró afectada. Estos resultados sugieren un rol de AQP8mt en la respuesta de los hepatocitos a la acidosis, contribuyendo a la disminución de la ureagénesis a partir de NH4+ para mantener la homeostasis acido-base.