Transferencia de ácidos grasos y Acyl-CoAs desde la proteína que une ácidos grasos de hígado (LFABP) hacia membranas

EDUARDO DE GERÓNIMO

Rosario

Jornada; Jornada de Lípidos; 2008

La proteína que une ácidos grasos de hígado (LFABP) pertenece a una familia de proteínas pequeñas citosólicas estructuralmente relacionadas que unen lípidos. Las proteínas que unen lípidos (FABPs) están probablemente involucradas en la captación y direccionamiento de ácidos grasos de cadena larga (LCFA) a organelas intracelulares y distintas rutas metabólicas, aunque su función fisiológica no se ha esclarecido aún. A diferencia de otras FABPs, LFABP no solo une LCFAs sino también una gran variedad de ligandos hidrofóbicos, entre los que se encuentran los acyl-CoAs, lo que podría tener un importante significado biológico. El objetivo de este trabajo fue el de analizar la capacidad de LFABP para transferir acyl-CoA a membranas artificiales y compararla con la transferencia de LCFA empleando ligandos naturales, para acercarnos mas al rol fisiológico de LFABP dentro de la célula. Hemos empleado dos mutantes puntuales de triptofano de LFABP en las posiciones 28 (L28W) y 74 (L74W), cuya fluorescencia es sensible a la unión de LCFA y acyl-CoA, respectivamente, lo cual nos da la chance de estudiar la interacción proteína-ligando y la transferencia de ligandos desde la proteína hacia membranas a través del análisis en la variación de la fluorescencia del Trp utilizando, por primera vez, ligandos naturales en lugar de los análogos fluorescentes empleados previamente. Nuestros resultados indicarían que LFABP une LCFA y sus acyl-CoA, mostrando un comportamiento cooperativo en la unión de los LCFAs, mientras que la unión es no cooperativa en el caso de los acyl-CoAs. Asimismo, hemos analizado las velocidades y mecanismos de transferencia de LCFAs y acyl-CoAs desde la proteína hacia vesículas fosfolipídicas. Los resultados indican un mecanismo difusional en la transferencia. La capacidad de los acyl-CoA para competir con los ácidos grasos por la unión a LFABP y ser transferidos a membranas puede contribuir a la comprensión del rol de los acyl-CoA en la modulación de la función de LFABP en las células.