“Modulación de la proliferación y de la apoptosis de linfocitos de ratones hembras en cultivo por la dehidroepiandrosterona y la N, N dimetilbiguanida: Metformina”.

MARIA EMILIA SOLANO; VALERIA SANDER; MIRIAM WALD; MOTTA AB

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; XXXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

Sociedad de Investigacion Clinica

El objetivo de este trabajo fue evaluar el mecanismo por el cual la dehidroepiandrosterona (D) y la Metformina (M) regulan la funcionalidad de los linfocitos T (LT). 107 LT extraídos de nódulos linfáticos de ratones hembras prepúberes BALB/c, fueron cultivados por 4h en medio RPMI a 37ºC con D10μM (D); M 10y100μM (M10 y M100); D+M10 ó 100μM (DM10 y DM100) y un grupo control (C), n=5/grupo. La proliferación (incorporación de timidina tritiada;%) basal no fue afectada en D (103±16) y disminuyó por igual en M10, M100, DM10 y DM100 (70±10;74±21;53±23;73±19 vs C:100±8 p<0,05). La proliferación con ConA 2μM disminuyó en D (3721±424), y en M10, M100, DM10 y DM100 en forma dependiente de la dosis de M(6258±1019;2841±379;765±289 y 203±16 vs C:7625±422,p<0.01). Se evaluó si la inhibición de la proliferación se debía a: 1)Apoptosis (por Anexina V;%). A las 4h los niveles de apoptosis no presentaron diferencias entre los tratamientos (p>0.05), mientras que a las 18h se incrementaron en los grupos M10, M100, DM10 y DM100 (88±2;86±4;89±4 y 85±6) y no varió en D(80,1±0,1) vs C (81±2) p<0,05; ó 2)Estado de oxidación celular (Indice de Lipoperoxidación(LPO): pmol malondialdheído/107células). D (39±2) no modificó el índice mientras M10, M100, DM10 y DM100 lo disminuyeron (35±5;27±6;33±5 y 29±6) vs C (42±2). Debido al controvertido rol del Oxido Nítrico (NO) mediando la apoptosis y como agente oxidante se evaluó actividad de la NO Sintasa (NOS, conversión de Arginina a Citrulina; mol NO/minx107células) que aumentó en D, M10, M100 y DM100 (8,3±0,3;8,1±1,2;8,5±0,7 y 8,4±0,2) vs C y DM10 (6,9±0,8 y 7,2±0,9) p<0,05. Conclusión: D disminuye la proliferación estimulada por una vía independiente de apoptosis y LPO. La M, a pesar de disminuir el estado oxidativo, disminuye la proliferación aumentando la apoptosis. D+M presenta un fuerte efecto sinérgico en la inhibición de la proliferación, mientras en apoptosis y LPO se observa solo el efecto de M. La presencia de D incrementa el NO sin variar apoptosis ni LPO, asimismo DM10 no varía el NO y si los restantes parámetros. Esto sugeriría que el NO no sería mediador de apoptosis y LPO y su rol en este sistema queda por ser estudiado.