Derivado de rhEPO como posible candidato para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson

MÓNICA MATTIO; NATALIA CEAGLIO; NORMA PEROTTI; MARCOS OGGERO; RICARDO KRATJE; MARINA ETCHEVERRIGARAY

Santa Fe

Simposio; V Simposio Latinoamericano de Tecnología de Cultivos Celulares (SLATCC); 2012

Laboratorio de Cultivos Celulares. FBCB. UNL

La enfermedad de Parkinson (EP) es un desorden neurodegenerativo progresivo que afecta neuronas dopaminérgicas. Se han propuesto un gran número de modelos in vitro e in vivo para su estudio. Muchos de ellos utilizan el compuesto 6-hidroxidopamina (6-OHDA) que, al ser transportado hacia al interior de los cuerpos celulares y de las fibras de neuronas dopaminérgicas y noradrenérgicas, ocasiona un efecto neurotóxico dada su potente acción inhibitoria de enzimas respiratorias mitocondriales. En consecuencia, las neuronas no pueden desarrollar su fisiología normal y mueren. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de una nueva combinación de glicoisoformas escasamente hematopoyéticas de eritropoyetina recombinante humana (rhEPO),  denominada neuroepoetin (rhNEPO), en un modelo de EP in vitro y otro in vivo empleando la 6 OHDA. Para el modelo in vitro, se emplearon células dopaminérgicas derivadas de un neuroblastoma humano, denominadas SH-SY5Y. Las células fueron tratadas con rhEPO y rhNEPO 24 h previas y 24 h concomitantes a la inducción de apoptosis con la neurotoxina 6-OHDA. El efecto de cada variante fue evaluado mediante ensayos de proliferación, tinción con colorante de Hoechst y marcación con anexina/yoduro de propidio, seleccionándose las condiciones más apropiadas para cada método. En todos los casos, tanto la rhEPO como la rhNEPO evidenciaron efecto protector de la apoptosis inducida sobre dicha línea celular.En el modelo in vivo, se emplearon ratas Wistar de dos meses de edad, inyectándose en forma estereotáxica una dosis de 606 ng de rhEPO o rhNEPO seguido de la inoculación de 20 µg de 6-OHDA en la región del núcleo estriado. En este modelo se observó protección frente a la pérdida de neuronas dopaminérgicas de la sustancia nigra del mesencéfalo por parte de la rhNEPO.Estas evidencias presentan a la rhNEPO como un prometedor candidato terapéutico para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas del sistema nervioso central tal como la EP.