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Los interferones (IFNs) constituyen un grupo de citoquinas sintetizadas y secretadas por una gran variedad de células frente a un proceso inflamatorio. Se caracterizan por su capacidad de interferir en el proceso de replicación viral y modificar la respuesta inmune frente a infecciones virales y bacterianas. Existen tres clases de IFNs: tipo I, II y III, siendo estos últimos los menos estudiados. Dentro de los IFNs de tipo I encontramos al IFN-alfa el cual presenta un amplio espectro de actividades biológicas: antiviral, antiproliferativa e inmunomoduladora. Dichas propiedades han resultado de gran interés para su estudio.En nuestro laboratorio se ha desarrollado una variante del IFN-alfa2b (IFN4N) que posee cuatro mutaciones puntuales que introducen sitios susceptibles para N glicosilación. Como resultado de las modificaciones mencionadas, el IFN4N presenta un elevado grado de glicosilación, lo cual determina un incremento de su carga y masa molecular y, en consecuencia, de su vida media plasmática. Considerando la gran relevancia que presentan las modificaciones post traduccionales en esta nueva variante de IFN, es imperativo emplear células animales como huéspedes para su producción. Sin embargo, debido al grado de dificultad y el bajo rendimiento asociados a la producción de proteínas recombinantes en células animales, resulta de gran importancia la generación de líneas y clones celulares que presenten una elevada productividad de IFN-alfa2b. Específicamente, el empleo de vectores lentivirales como herramienta de transferencia de material genético permite lograr la incorporación de un gran número de copias del transgen de interés en zonas del genoma con una elevada tasa de transcripción, conduciendo a una mayor expresión de la proteína recombinante de interés. Además de constituir el pilar de un proceso productivo óptimo, una elevada productividad celular permite obtener una adecuada cantidad de la citoquina, facilitando así una exhaustiva caracterización del IFN4N así como de nuevas variantes hiperglicosiladas del IFN-alfa2b como potenciales agentes clínicos. Por este motivo, el objetivo principal de este trabajo consistió en emplear vectores lentivirales para obtener un clon de células CHO.K1 productor de IFN4N que presente una mayor productividad con respecto a la exhibida por el clon productor existente (CHO pCIneo IFN4N clon 3D2F5), generado mediante el uso de vectores plasmídicos convencionales. Además, se buscó preservar las características de la molécula producida por ambos clones.

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