Efecto de sustratos xenobióticos sobre biocatalizadores vegetales:inducción de muerte celular programada.

ANELLO A; MASCOTTI ML; MOLINA A; KURINA SANZ M; ORDEN AA

La Plata

Encuentro; V EnReBB; 2012

SAByB (Sociedad Argentina de Biocatálisis y Biotransformaciones)

El estudio de las reacciones biocatalíticas a célula entera se centra generalmente en las conversiones, selectividades y rendimientos de las mismas. Poco se conoce sobre los efectos que ejercen los compuestos xenobióticos en el metabolismo a nivel celular y molecular. Está claro que su naturaleza química y las concentraciones utilizadas pueden afectar no sólo la actividad enzimática específicamente buscada, sino también la fisiología y bioquímica de las células. Varios estudios permiten evaluar la influencia que tienen estos y otros factores de estrés sobre modelos vegetales. En este trabajo, estudiamos la posible inducción de muerte celular programada (PCD) y las consecuencias sobre algunos parámetros de estrés oxidativo en células indiferenciadas de T. absinthioides utilizadas como biocatalizadores para la reducción asimétrica de cetonas proquirales. Para evaluar la inducción de PCD en células tratadas con diferentes concentraciones de metilfenilcetonas, se realizó el análisis de la integridad del ADN por electroforesis en gel de agarosa. En dicha técnica se observa la presencia de fragmentos de ADN múltiplos de 180 pb en forma escalonada (conocido como DNA laddering) en células que han desencadenado este mecanismo de muerte [1]. Para evaluar la defensa antioxidante se analizaron la actividad de superóxido dismutasa y las concentraciones de glutatión reducido. Por otra parte, el daño celular se estimó a partir de los niveles de lipoperoxidación [2]. En base a los resultados obtenidos, se concluye que las concentraciones de acetofenona y derivados sustituídos en el anillo aromático que indujeron PCD son significativamente superiores a las empleadas en las reacciones de biotransformación optimizadas, observándose cundo esto ocurre la pérdida total de la capacidad biocatalítica de las células. Por otro lado, no hubo correlación entre PCD y el perfil oxidativo evidenciado por los parámetros bioquímicos medidos.