INVESTIGADORES
CASAS Adriana Gabriela
congresos y reuniones científicas
Título:
Uso de dendrímeros de ALA en el tratamiento fotodinámico del cáncer y lesiones ateroscleróticas
Autor/es:
RODRIGUEZ L; DI VENOSA G; CANCELADA L.; MAMONE L; GÁNDARA L; BATLLE A; CASAS A
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; 14vo congreso internacional de medicina interna del Hospital de Clínicas; 2012
Institución organizadora:
Hospital de Clínicas Gral José de San Martín
Resumen:
La Terapia Fotodinámica (TFD) es un tratamiento
antitumoral que consiste en la administración de un fotosensibilizante que se
localiza selectivamente en el tumor. Mediante la iluminación de la zona tumoral
con una longitud de onda tal que active al fotosensibilizante, se desencadena
una serie de reacciones mediada por radicales libres que induce la muerte de
las células tumorales. Nuestro grupo se ha especializado en la
fotosensibilización endógena con las porfirinas
biosintetizadas a partir del precursor ácido 5-aminolevúlico (ALA). Otro de los
usos emergentes de la Terapia Fotodinámica
es la denominada Fotoangioplasía, que consiste en la TFD de lesiones
ateroscleróticas. La placa aterosclerótica está formada
principalmente macrófagos, linfocitos T y células de músculo liso. Dado que el ALA es una molécula hidrofílica, su
incorporación a la célula podría incrementarse mediante la modificación con
sustituyentes que aumenten su lipofilicidad. Con el fin de
optimizar la TFD
hemos diseñado una serie de dendrímeros
conteniendo ALA. La captación de dendrímeros por los macrófagos del
sistema retículoendotelial ha sido vista principalmente como un hecho a evitar
en la TFD del
cáncer, ya que los mismos secuestran moléculas que deberían ser dirigidas a la
zona tumoral. La idea de este trabajo es
la de aprovechar esta propiedad para atacar selectivamente las placas
ateromatosas mediante fotosensibilización de sus componentes macrofágicos,
dejando las estructuras vasculares intactas.
El
objetivo inmediato fue el de estudiar dos dendrímeros de ALA, para facilitar su
incorporación a células tumorales y mejorar la eficiencia de la TFD del cáncer, y además estudiar
la captación de dichos dendrímeros en macrófagos y células endoteliales, y su respuesta
a la fotosensibilización, como modelo de fotoangioplastía.
Se emplearon dendrímeros
de ALA conteniendo 6 moléculas de ALA (6m-ALA) ó 9 (9m-ALA) que fueron
sintetizados en University College London, Reino Unido.
Para
evaluar la efectividad de la TFD
antitumoral, se analizó la síntesis de porfirinas in vitro, utilizando la línea de adenocarcinoma murino LM3 por
medio de extracción química y cuantificación fluorométrica.
Como
modelo de fotoangioplastía se emplearon macrófágos Raw 264.7 que se expusieron
a los dendrímeros durante tiempos de 3 y 24 hs. Paralelamente, como modelo de epitelio
vascular, usamos células de microendotelio vascular
inmortalizadas HMEC-1.
Encontramos que tanto para la línea
LM3, HMEC-1 y Raw 264.7, la liberación
de ALA y síntesis de porfrinas a partir de los dendrímeros 6m-ALA y 9m-ALA es
total a las 24 hs de incubación, mientras que a las 3 hs, la liberación es
parcial, lo cual coincide con el uso de un sistema de liberación lenta como son
los dendrímeros. Por otra parte, la síntesis de porfirinas es mayor a las 3 hs
en la línea macrofágica (6m-ALA= 52 ± 6 µg
porfirinas/105 cél, 9m-ALA= 59 ± 7 µg porf./105 cél) respecto a la
línea endotelial HMEC-1 (6m-ALA= 28 ± 3 µg porf./105
cél, 9m-ALA= 27 ± 2 µg porf./105 cél) empleando ALA 0,2 mM (p< 0,01),
demostrando la selectividad de los dendrímeros por los macrófagos.
En células tumorales LM3, la
síntesis de porfirinas a partir de los dendrímeros es mucho mayor que a partir
de ALA (ALA= 48 ± 6 µg porf./105 cél, 6m-ALA= 168 ± 19 µg porf./105 cél, 9m-ALA= 176 ± 20 µg porf./105
cél) a las 3 hs con ALA 0,025
mM, demostrando que los dendrímeros de ALA son más
eficaces que el ALA para su uso en la
TFD del cáncer.
Conclusiones: Los dendrímeros del ALA son promisorios en la TFD del cáncer ya que inducen
una mayor acumulación de fotosensibilizante a menores concentraciones, en
células tumorales. También lo serían en el tratamiento de fotoangioplastía ya
que los mismos demostraron in vitro tener selectividad por el componente
macrofágico de la placa ateromatosa, en comparación con el endotelio vascular.