Efecto de acetilcolina endogena sobre la migracion de celulas dendriticas y monocitos hacia celulas trofoblasticas humanas y contribucion a un ambiente tolerogenico

1. PAPARINI D, GORI S, GRASSO E, SCORDO W, RAMHORST R, SALAMONE G, P¨¦REZ LEIR¨®S C.

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunion Anual de SAIC; 2012

SAIC

La generaci¨®n y desarrollo de la interfase materno-placentaria es un proceso din¨¢mico que involucra la acci¨®n concertada de c¨¦lulas y mediadores favoreciendo un ambiente tolerog¨¦nico. Celulas dendriticas (CD) y macrofagos, son reclutados y educados por celulas trofoblasticas (Tb) para promover el crecimiento fetal. Las celulas inmunes y la placenta presentan un sistema colin¨¦rgico no neuronal,  sin embargo, su participacion en la induccion del ambiente tolerogenico en la interfase temprana no se ha aclarado a¨²n. Nuestro objetivo fue evaluar el efecto de acetilcolina (ACh) endogena en la interaccion de Tb con CD y monocitos (Mo). Se purificaron Mo de sangre periferica de voluntarios sanos por tecnicas inmunomagneticas (pureza >95%). Para obtener CD, los Mo se diferenciaron 5 dias con IL-4/GM-CSF. Se evaluo la expresion de colina acetil transferasa (ChAT), acetilcolinesterasa (AChE) y receptores muscarinicos M1-M5 en la linea celular trofoblastica Swan-71 por RT-PCR y WesternBlot. Mediante co-cultivo de celulas inmunes con Tb,  se analizo la migracion de CD y Mo hacia Tb, su interaccion, y el efecto de ACh endogena por citometria y deteccion de MCP-1, IL-10 y TNF-a por ELISA. Observamos que Tb expresa ChAT, AChE y los 5 subtipos de receptor. La neostigmina (Neo) 20 uM aumento la produccion de IL-10 en Tb, sin variar TNF-¦Á ni MCP-1. En la interaccion Tb-CD se observo aumento de IL-10 y aumento de MCP-1 inducido por Neo. El medio condicionado (MC) de Tb indujo migracion de CD (X+-ES: 3.674/193 vs 413/104 cel/90 min; P<0,01) independientemente de Neo. La migraci¨®n de Mo por el MC, en cambio, fue mayor en presencia de Neo (7.509/651 vs 4.882/558 cel/min; P<0,01). Dicha interaccion aumento la produccion de IL-10. En conclusion, las celulas Tb presentan un sistema colinergico completo que contribuye a un ambiente tolerogenico y que en la interaccion con CD induce aumento de MCP-1 y migracion de monocitos.