INVESTIGADORES
CASAS Adriana Gabriela
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudios in vitro e in vivo de nuevos derivados dipeptídicos de ALA para su uso en Terapia Fotodinámica
Autor/es:
DI VENOSA G; RODRIGUEZ L; MAMONE L; GÄNDARA L.; BATTAH S; MACROBERT A; BATLLE A; CASAS A
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVI Reunión anual de la SAIC; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La Terapia Fotodinámica (TFD) es un tratamiento
antineoplásico basado en la acumulación preferencial de un fotosensibilizante
en las células tumorales. La iluminación
con una luz de longitud de onda adecuada, produce la destrucción selectiva del
tejido tumoral. El uso endógeno de las porfirinas generadas a partir del ácido
5-aminolevulínico (ALA) ha ampliado el uso de la TFD. La eficacia de
ALA-TFD está limitada por la naturaleza hidrofílica de la molécula. El objetivo
de este trabajo fue testear dos derivados hidrofóbicos dipeptidicos de ALA:
AcLeuALAMe y AcPheALAMe in vitro en dos líneas celulares, PAM212 y su derivada
transfectada con el oncogén Ras, PAM212-Ras. También se estudió la síntesis de
porfirinas in vivo a partir de los derivados, en un modelo de células LM2 transplantadas
subcutáneamente. La viabilidad celular se determinó por medio del ensayo del
MTT y se determinaron las dosis lumínicas letales 50 (LD50) como los Joules/cm2
que producen el 50% de la reducción de viabilidad. Las porfirinas sintetizadas
intracelularmente a partir de ALA o sus derivados, se cuantificaron en un
fluorómetro luego de su extracción con HCl 5% o con un acople de fibra óptica
para medir in vivo la fluorescencia superficial del tumor.
In vitro, ambas líneas alcanzaron un
plateau de síntesis de porfirinas a las 3h de incubación con una concentración
de 0,01 mM
de los derivados, mientras que con ALA el plateau se logró con 0,5 mM. La línea celular
PAM212-Ras mostró mayor síntesis de porfirinas que la línea PAM212 con cada uno
de los compuestos estudiados, sin embargo empleando 0,01 mM mostró mayor
resistencia a la TFD,
siendo sus LD50: 0,036 J/cm2 para AcLeuALAMe en PAM212; 0,077 J/cm2 para
AcLeuALAMe en PAM212; 0,041 J/cm2 para
AcPheALAMe en PAM212-Ras, y 0,097para AcPheALAMe en PAM212-Ras. Esta mayor
resistencia en las células trabsfectadas con el oncogén Ras ha sido previamente
observada con otros fotosensibilizantes en otras líneas. Además, ambos
derivados peptídicos del ALA aumentan la eficacia a la TFD, dado que mostraron mayor
eficacia que ALA en la síntesis de porfirinas.
In vivo, al administrar los compuestos
por vía i.p. en ratones portadores de LM2, se obtiene una mayor síntesis
porfirínica con AcPheALAMe, en todos los tejidos, especialmente en tumor. Los
mejores resultados se obtuvieron con la administración tópica de los derivados,
donde la relación de porfirinas Tumor/Piel es de 0,8 para PheALAMe, mientras
que en ALA es 0,5, lo que reduciría los efectos adversos de fotosensibilización
cutánea de la TFD.
De los resultados, podemos concluir que
los derivados dipéptidos de ALA pueden ser una muy buena opción para la TFD, siendo AcPheALAMe el más
prometedor.