INVESTIGADORES
MICHAUT Marcela Alejandra
congresos y reuniones científicas
Título:
EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS SNAPs EN OVOCITO DE RATÓN
Autor/es:
DE PAOLA, MATILDE M.; GALLO, GIOVANNA L.; MAYORGA, LUIS S.; MICHAUT, MARCELA A.
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La
exocitosis de los gránulos corticales (EGC) constituye el bloqueo primario de
la poliespermia. El mecanismo molecular de este proceso no ha sido dilucidado
hasta el momento, y
sólo se conocen 4 proteínas asociadas al mismo: Rab3A, sintaxina 4, Rabfilina 3
y SNAP-25. Muchas
de las familias de proteínas involucradas en fusión vesicular presentan un alto
grado de conservación de levaduras a mamíferos, hecho que puede ser
interpretado como un indicativo de que la mayoría, sino todos los procesos de
fusión de membranas usan la misma maquinaria molecular. Teniendo en cuenta esta
premisa, formulamos como hipótesis de trabajo la presencia de las proteínas
SNAPs en el ovocito de ratón. Las SNAPs son una familia de proteínas que desempeñan
un rol clave en la fusión de membranas. En mamíferos se han descripto tres
isoformas α, β y ɣ. En
ratones hyh, cepa que presenta una mutación puntual
en el gen de α SNAP (M105I), se ha verificado que, además de exhibir problemas
neurológicos, son estériles. La infertilidad de los machos es debida a que la
proteína α SNAP mutada altera la exocitosis acrosomal. Sin embargo, se desconoce la causa de la
infertilidad de las hembras hyh y, aún más, se desconoce si SNAP está presente
en el ovocito. Con el objetivo de
identificar la/s isoforma/s de SNAP presente/s en el ovocito de ratón se
realizó RT-PCR. El estudio de la localización subcelular y el análisis de la
expresión durante la maduración fueron realizados mediante IFI y WB, utilizando
un anticuerpo que reconoce conjuntamente las isoformas α/β. Los resultados muestran que α y ɣ SNAP están presentes
en ovocitos de ratón, validando nuestra hipótesis de trabajo. Además, la isoforma α se localiza en la región
cortical rica en GC, no presentando diferencias significativas en los niveles
de expresión en los distintos estadíos celulares analizados. La localización de
α SNAP en la región cortical sugiere que dicha proteína
podría estar asociada a los GC, y posiblemente a la EGC.