INVESTIGADORES
AQUINO Jorge Benjamin
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio de la capacidad migratoria de las células mesenquimales estromales al hepatocarcinoma
Autor/es:
BAYO J; BOLONTRADE MF; SGANGA L; MALVICINI M; ALANIZ L; AQUINO JB; FIORE E; RIZZO MM; RODRIGUEZ A; LORENTI A; ANDRIANI O; PODHAJCER O; GARCÍA MG; MAZZOLINI G
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XVI Congreso Argentino de Hepatología; 2011
Resumen:
El
hepatocarcinoma (HCC) es el 6º tumor sólido más frecuente y la tercera causa de
muerte asociada a cáncer en el mundo. El HCC se desarrolla en la mayoría de los
casos en pacientes con cirrosis hepática. El establecimiento y diseminación de
un tumor depende no sólo del comportamiento de las células tumorales sino
también del aporte del microambiente tumoral, donde además de la presencia de
distintos tipos celulares como fibroblastos y macrófagos, intervienen factores
pro-inflamatorios y quimiocinas. Estas quimiocinas son esenciales en el
reclutamiento de las células mesenquimales estromales (MSC) capaces de migrar
hacia sitios de injuria o remodelamiento tisular. El objetivo de este trabajo
es estudiar la capacidad migratoria in vitro e in vivo de las MSC humanas
provenientes de medula ósea (hMSC) de donantes sanos hacia el HCC. Ensayos de
migración in vitro en cámaras de Boyden demostraron que las hMSC presentaron
una elevada capacidad de migrar hacia medios condicionados (MC) derivados de
líneas celulares de HCC humano (Hep3B, HuH7 y PLC/PRF/5), de cultivo primario
de muestra de paciente (HC-PT-5) y de células estrelladas hepáticas humanas (línea
LX-2), pero no presentaron migración hacia MC provenientes de fibroblastos
(WI-38), células endoteliales (HMEC-1) o tejido no tumoral de muestra de
paciente (AT-PT-5) (p<0.01; Kruskal-Wallis). Además, los MC de las células
cultivadas en monocapa indujeron mayor migración de las hMSC que los MC
obtenidos de cultivos en esferoides o de tumores ex vivo (p<0.05,
Kruskal-Wallis). Los MC de las líneas de HCC y LX-2 incrementaron la adhesión
de las hMSC a fibronectina, colágeno y células endoteliales, además de inducir
la invasión a través de estos sustratos y aumentar la actividad de la
metaloproteinasa 2. Para evaluar la migración in vivo, se inocularon de manera
subcutánea o intrahepática con o sin cirrosis subyacente ratones nude BALB/c
con HuH7. Con el tumor establecido se administraron las hMSC marcadas con los
colorantes CMDil y DiR por vía intravenosa y se monitorizó la biodistribución
en un bioluminómetro y la presencia de hMSC en los tejidos por microscopía de
fluorescencia luego de sacrificar a los ratones al día 7. Las hMSC se
localizaron en pulmón a 1 h y a las 24 h fueron observadas también en hígado y
bazo. A los 7 días se localizaron en los órganos descriptos y en los tumores en
el modelo tumoral subcutáneo. Sin embargo los MC derivados de hígado, bazo o
pulmón de ratones portadores de tumor no indujeron la migración in vitro de las
hMSC. Sorprendentemente, en el modelo ortotópico, las hMSC fueron localizadas
preferentemente en el hígado a los 7 días. Nuestros resultados indican que
factores producidos por el HCC y las células estrelladas hepáticas inducen la
migración in vitro e in vivo de las hMSC. El estudio de estos mecanismos
permitirá mejorar el reclutamiento de las hMSC hacia el tumor a fin de
utilizarlas como vehículos celulares de agentes terapéuticos en el HCC.