INVESTIGADORES
AQUINO Jorge Benjamin
congresos y reuniones científicas
Título:
Efectos antitumorales de un inhibidor de la síntesis de ácido hialurónico en un modelo murino de hepatocarcinoma ortotópico
Autor/es:
PICCIONI F; MALVICINI M; RIZZO M; KIPPES N; ATORRASAGASTI C; RODRIGUEZ A; AMANTE M; FIORE E; BAYO J; AQUINO J; GARCÍA M; SILVA M; ALANIZ L; MAZZOLINI G
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XVI Congreso Argentino de Hepatología; 2011
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Estudio de Enfermedades del Hígado (AAEEH)
Resumen:
Introducción: La
cirrosis se caracteriza por una acumulación excesiva de componentes de la
matriz extracelular, entre los que se encuentra el ácido hialurónico (HA).
Dicho proceso puede ser considerado una enfermedad pre-neoplásica que favorece
la aparición del hepatocarcinoma (HCC). En la mayoría de los tumores la
biosíntesis alterada de HA se asocia con mecanismos que favorecen la progresión
tumoral, sin embargo su papel en el HCC aún no está claro.
4-methylumbelliferona (4MU), un agente oral biodisponible, es un inhibidor
específico de la síntesis de HA con propiedades antitumorales en ciertos tipos
de cáncer, como próstata y melanoma. El objetivo del presente trabajo fue
analizar si la inhibición de la síntesis de HA por 4MU durante el desarrollo de
la fibrosis hepática afecta la tumorogénesis en un modelo de HCC ortotópico
establecido en ratones. Materiales y métodos: Utilizamos un modelo murino de
HCC ortotópico, inoculando 1,25x105 células Hepa129 por inyección subcapsular
en hígados con fibrosis avanzada inducida por tioacetamida (200 mg/kg, 3
veces/semana durante 28 días). Posteriormente, los animales fueron tratados con
4MU por vía i.p. a dosis de 20mg/kg/día durante 14 días. Evaluamos los efectos
biológicos de 4MU en células Hepa129 y en una línea de células estrelladas
hepáticas (HSCs) in vitro, analizando proliferación por incorporación de 3H,
apoptosis por naranja de acridina y bromuro de etidio y citotoxicidad por
detección de la actividad LDH. Se analizó el crecimiento tumoral mediante
medición con calibre del nódulo principal y sus nódulos satélites, el nivel de
HA en suero mediante ELISA. Se estableció el estadio de fibrosis según el
índice Metavir (F0: sin fibrosis, F4: cirrosis); además, se estudió el grado de
activación de las HSC mediante la cuantificación del área positiva para actina
de músculo liso (a-SMA). Resultados: El tratamiento del HCC con 4MU inhibió
significativamente la proliferación de células tumorales (p<0.01, ANOVA) e
indujo su apoptosis (p<0.05, ANOVA); a su vez, el cultivo primario de
hepatocitos no se vio afectado lo que refleja la baja toxicidad de 4MU. La
terapia con 4MU redujo los niveles hepáticos y sistémicos de HA (p<0.05,
Mann Whitney). El análisis histológico de los tumores provenientes de animales
tratados con 4MU mostraron extensas áreas de necrosis, infiltrado inflamatorio
y reducción de 2-3 veces del número de nódulos satélites (p < 0.05, Mann
Whitney). Además, no se observaron signos de toxicidad y los niveles de ALT no
se modificaron tras la terapia con 4MU. Los animales tratados con 4MU mostraron
una reducción en el grado de fibrosis en comparación a los controles (F1-2 vs
F2-3, respectivamente). 4MU indujo apoptosis de HSCs in vitro (p<0.05,
ANOVA) y redujo la cantidad de HSCs activadas in vivo (p<0.001, ANOVA).
Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que 4MU tiene efectos terapéuticos
beneficiosos en un modelo de HCC asociado a fibrosis lo cual amerita
profundizar en su estudio.