Expresión de la proteína VDAC1 en un modelo celular de fibrosis quística.

TAMINELLI, G.L.; VALDIVIESO, A. G; SÁNCHEZ, F.; CLAUZURE, M.; MASSIP COPIZ, M.M.; SCHULMAN, G.; TEIBER, M.L.; SANTA COLOMA, T.A .

Mar del Plata

Congreso; LVI REUNION CIENTIFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas (SAIC); 2011

SAIC

En nuestro laboratorio hemos trabajado durante varios años en el estudio de la expresión diferencial de algunas proteínas mitocondriales como CISD1 (Taminelli, 2008) y MTND4 (Valdivieso, 2007) y en la medición de la actividad NADH deshidrogenasa del Complejo I de la cadena respiratoria  (Valdivieso, 2011, en prensa), en modelos celulares de FQ. La actividad NADH deshidrogenasa medida in gel mediante BN-PAGE,fué normalizada inicialmente usando la densitometría de las bandas de proteínas teñidas con Coomassie.  Posteriormente, con el objeto de contar con un estándar interno mitocondrial, se procedió a  realizar WBs en paralelo con los BN-PAGE. En dichos WBs hemos medido la expresión de la subunidad UQCRC1 del Complejo III de la cadena respiratoria y la subunidad VDAC1.  La proteína VDAC1 (Voltage Dependent Anion Channel 1) del poro mitocondrial es ampliamente utilizada como estándar interno para “Western blots” (WBs), en experimentos realizados en el estudio de expresión y actividad de proteínas mitocondriales.  Inesperadamente, nuestros estudios evidencian un patrón de expresión diferencial de VDAC1 respecto de la proteína UQCRC1 en líneas celulares C38, S9, IB3-1 del modelo celular de fibrosis quística, tratadas con 20 mM isoproterenol, 500 mM IBMX y 200mM db-AMPc.  Recientemente se ha observado una expresión diferencial de VDAC1 en líneas celulares de cardiomiocitos en distintos estadíos de diferenciación tratadas con isoproterenol (Branco, 2011).  El tratamiento de las células C38 con la mezcla de activadores del CFTR provocó una disminución de la expresión de VDAC1.  Dicho efecto no fue observado las células S9 e IB3-1, por lo que la deleción en la región amino terminal del CFTR que portan las células C38 podría intervenir, al menos en parte, en el comportamiento diferencial de la expresión de VDAC1. Agradecimientos: Subsidios del CONICET (PIP 2009-2011), ANPCYT (PICT2007, 0628) y UCA. Becas CONICET (AGV y MMMC), ANPCYT (MC) y UCA (GLT, FS, MLT).