UN NUEVO ROL PARA EL ASCORBATO EXTRACELULAR DURANTE EL DESARROLLO FOLIAR DE GIRASOL: IDENTIFICACIÓN DE SU ACTIVIDAD INHIBITORIA DE PEROXIDASAS APOPLÁSTICAS

PINEDO M; LECHNER L; CREUS C; AGUIRREZABAL L

Rosario

Congreso; XIII Reunión Latinoamericana y XXVII Reunión Argentina de Fisiología Vegetal.; 2008

Asociación Argentina de Fisiología Vegetal.

UN NUEVO ROL PARA EL ASCORBATO EXTRACELULAR DURANTE EL DESARROLLO FOLIAR DE GIRASOL: IDENTIFICACIÓN DE SU ACTIVIDAD INHIBITORIA DE PEROXIDASAS APOPLÁSTICAS. Pinedo M1*, Lechner L2*, Creus C3, Aguirrezabal L2,3. *Ambos autores contribuyeron igualmente al presente trabajo. 1-Instituto de Investigaciones Biologicas- Facultad de Ciencias Exactas y Naturales UNMDP Funes 3250 4to nivel Mar del Plata. mpinedo@mdp.edu.ar 2- CONICET, 3 Facultad de Ciencias Agrarias, UNMDP- 4-UIB-Balcarce Las peroxidasas participan de diferentes procesos fisiológicos que incluyen el endurecimiento y ablandamiento de paredes celulares y la detoxificación de especies activas de oxígeno generadas en diferentes situaciones de estrés. El presente trabajo tuvo por objetivo analizar las peroxidasas solubles del apoplasto durante el desarrollo de hojas de girasol. Los resultados muestran que en los fluidos extracelulares (IWF) obtenidos por infiltración y centrifugación de hojas de girasol existe una actividad de peroxidación de Tetrametilbencidina (TMB) que se incrementa luego de que las hojas alcanzan su máxima superficie. Sin embargo, zimogramas semidesnaturalizantes realizados con el IWF de hojas de distinto grado de desarrollo y 4-Cloronaftol como sustrato mostraron la presencia de la enzima en hojas aún en expansión, sugiriendo la existencia de un mecanismo regulatorio en esa misma fracción. Los IWFs de hojas jóvenes inhibieron significativamente la actividad de fluidos obtenidos de hojas completamente desarrolladas, indicando la presencia de un inhibidor apoplástico. La actividad inhibitoria disminuyó durante el desarrollo de la hoja, en forma inversa a la actividad peroxidasa. Los ensayos de caracterización mostraron que se trataba de una molécula de naturaleza no proteica y peso molecular menor a 3 kDa compatible con inhibidores como los ácidos salicilhidroxámico y ascórbico previamente descriptos en otros órganos. El rol del ascorbato como inhibidor de peroxidasas apoplásticas se confirmó en incubaciones de IWFs de hojas expandidas y ascorbato comercial y posteriormente con la desaparición de la actividad inhibitoria de los IWFs de hojas jóvenes incubados con ascorbato oxidasa. Este reporte constituye una evidencia del rol del ascorbato extracelular como regulador endógeno de la actividad de peroxidasas apoplásticas durante el crecimiento foliar.