“Sam68 media el crecimiento celular estimulado por leptina, participando en la señalización del receptor de leptina en células trofoblásticas JEG-3”

F SÁNCHEZ JIMENEZ; A PÉREZ PÉREZ; A CARMONA FERNÁNDEZ; J MAYMÓ; Y GAMBINO; C VARONE; C GONZALES YANES; V SÁNCHEZ MARGALET

Barcelona

Congreso; • XXXIV Congreso de la Sociedad española de Bioquímica y Biología Molecular; 2011

SEBBM

Sam68 media el crecimiento celular estimulado por leptina, participando en la señalización del receptor de leptina en células trofoblásticas JEG-3 Flora Sánchez Jiménez1, Antonio Pérez Pérez1, Antonio M. Carmona Fernández1, Julieta Maymó2, Yésica Gambino2, Cecilia Varone2, Carmen González-Yanes1 y Víctor Sánchez-Margalet1 1Hospital Universitario Virgen Macarena, Bioquímica Clínica, Sevilla, 2Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires (Argentina)Sam68, miembro de la familia STAR de proteínas de unión al ARN, se ha relacionado con diferentes sistemas de señalización, como el receptor de leptina (LEPR), donde actuaría como molécula adaptadora. La activación de LEPR estimula las vías de señalización JAK-STAT, MAPK y PI3K mediando los efectos biológicos de la leptina, como ocurre en células trofoblásticas. Se ha visto previamente que la estimulación con leptina también promueve la sobreexpresión y la Tyr-fosforilación de Sam68 en células trofoblásticas JEG-3, sugiriendo un papel para Sam68 en las principales rutas de señalización activadas por LEPR para incrementar el crecimiento y proliferación de estas células. Metodología: Inhibimos la expresión de Sam68 en células JEG-3 y estudiamos la señalización de LEPR mediante inmunoprecipitación, precipitación por afinidad a poliU y analizando los niveles de fosforilación de las proteínas de señalización por immunoblot. El efecto de la leptina sobre la síntesis proteica y proliferación se estudió mediante incorporación de 3[H]-leucina y 3[H]-timidina. Resultados: La inhibición de la expresión de Sam68 disminuyó la activación mediada por leptina de las vías de señalización JAK-STAT, PI3K y MAPK en JEG-3. Además, la Tyr-fosforilación de Sam68 mediada por leptina fue dependiente de la actividad JAK-2, ya que el inhibidor farmacológico AG490 disminuyó la fosforilación de Sam68 en estas células. Finalmente, el efecto trófico y proliferativo de la leptina en células trofoblásticas depende de la expresión de Sam68, ya que la regulación a la baja de Sam68, disminuyó la síntesis de proteínas y DNA mediado por leptina. Conclusión: Sam68 participa en las principales vías de señalización de LEPR para mediar el efecto trófico y proliferativo de la leptina en células trofoblásticas