Efecto dual del AMPc en la regulación de la expresión de leptina en placenta

JULIETA LORENA MAYMÓ; VICTOR SÁNCHEZ-MARGALET; JUAN CARLOS CALVO; CECILIA LAURA VARONE

Mar Del Plata. Buenos Aires

Congreso; LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) 2008; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

La leptina (LEP) ha sido propuesta como una molécula fundamental en la regulación de la implantación y en el mantenimiento del embrión. Es una hormona de 16kDa descubierta en tejido adiposo con la función de regular el balance energético del organismo. También es expresada en placenta humana donde podría tener efectos sobre el crecimiento, la angiogénesis y la inmunomodulación. El rol de la leptina en la implantación y crecimiento embrionario es aún desconocido. Hemos demostrado que estradiol y hCG inducen la expresión de leptina en células placentarias. La activación de la vía del AMPc coordina procesos celulares y media la acción de diversas hormonas en la placenta. El objetivo del presente trabajo fue estudiar  el rol del AMPc en la regulación de la expresión de leptina en placenta y los mecanismos involucrados; utilizando como modelo la línea celular trofoblástica BeWo y explantos de placenta humana. Por western blot determinamos que el AMPc (1µM) estimuló la expresión de leptina en células BeWo (2.5 veces). El tratamiento con H89 50µM (inhibidor de PKA) suprimió dicho efecto. Obtuvimos similares resultados en explantos de placenta, donde también el AMPc indujo la fosforilación de CREB y de MAPK de manera dosis dependiente. En ensayos de gen reportero con plásmidos conteniendo el promotor de leptina y el gen luc determinamos que el AMPc (0.1-10µM) estimuló la expresión de leptina hasta 6 veces. El tratamiento con SQ22536 (inhibidor de AC) reprimió este efecto. Por otro lado, observamos que altas concentraciones de AMPc (100-1mM) inhibieron la activación del promotor (3 veces). Más aún, cuando se sobrexpresaron la subunidad catalítica de PKA o el factor de transcripción CREB o ambos, la expresión de leptina se reprimió drásticamente (3, 7 y 16 veces respectivamente). Los resultados obtenidos mejoran la comprensión de los mecanismos que regulan la expresión de leptina en trofoblastos humanos por la interrelación de diversas vìas de señalización activadas por AMPc.