S100A10 AUMENTA LA RESISTENCIA DE LAS CÉLULAS TUMORALES PANCREÁTICAS AL TRATAMIENTO CON GEMCITABINA MEDIANTE LA INHIBICIÓN DE LA AUTOFAGIA MEDIADA POR VMP1.

PARDO, R.; ALEJANDRO JAVIER ROPOLO; GRASSO, D.; MOLEJÓN, M. I.; IOVANNA, J. L.; VACCARO, M. I.

Mar del Plata, Argentina.

Congreso; LV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Científica Anual 2010 de la Sociedad Argentina de Fisiología y XLII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental.; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS) y Sociedad Argentina de Farmacología Experimental (SAFE).

La autofagia es un proceso de degradación de constituyentes celulares citoplasmáticos. VMP1 (Vacuole-Membrane-Protein-1) es una proteína inducida durante la pancreatitis que gatilla la autofagia en células de mamífero. Las células tumorales pancreáticas son altamente resistentes al tratamiento. Recientemente, demostramos que la gemcitabina, el agente quimioterapeútico estándar para el cáncer de páncreas, es capáz de inducir la expresión de VMP1 en células tumorales pancreáticas llevando a la autofagia y posterior muerte por apoptosis. Con el objetivo de profundizar los eventos moleculares implicados en la resistencia de las células tumorales pancreáticas, buscamos interactores de VMP1 utilizando la estrategia de doble híbrido. Encontramos que VMP1 interactúa con S100A10, un miembro de la familia de proteínas S100, que aumenta su expresión en el cáncer de páncreas. Confirmamos la interacción VMP1-S100A10 mediante el ensayo de pull-down. Mediante Real Time RT-PCR mostramos que la expresión del S100A10-RNAm es mayor en células MIAPaCa-2 que en células HeLa. Utilizando el reagrupamiento de LC3 como marcador de autofagia, analizamos el efecto de la sobreexpresión de S100A10 sobre la autofagia mediada por VMP1. Demostramos que S100A10 reduce la formación de autofagosomas inducida por el tratamiento con gemcitabina y por la sobreexpresión de VMP1. Asimismo, la sobreexpresión de S100A10 modificó la localización subcelular de VMP1, cambiando de un patrón agrupado a una distribución reticular, similar al retículo endoplásmico. Mediante citometría de flujo de células marcadas con Anexina V y 7-AAD y ensayo de actividad de caspasa-3, determinamos que la inhibición de la expresión de S100A10 utilizando un shRNA específico incrementó la apoptosis en las células tratadas con gemcitabina. Concluimos que la expresión de S100A10 reduce la autofagia mediada por VMP1 e incrementa la resistencia de las células tumorales pancreáticas al tratamiento con gemcitabina.