Nanoanticuerpos contra la proteína Spike del coronavirus SARS-CoV-2 neutralizan variantes del virus

IBAÑEZ, LI; PAVAN, MF; BOK M; PARREÑO, V

Vaquerías Códoba

Workshop; XLIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2023

SAV

El Síndrome Respiratorio Agudo Severo Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) es el agente causal de la neumonía atípica, COVID-19, que apareció por primera vez a finales de diciembre de 2019. El brote de SARS-CoV-2 ha representado un gran desafío para los sistemas de salud pública a nivel mundial. Continuamente s e detectan nuevas variantes del SARS-CoV-2, por lo que el desarrollo de antivirales para combatir la infección es una necesidad crítica, incluso en un contexto donde las vacunas están disponibles. Estos antivirales pueden proporcionar tratamiento a personas no vacunadas, abordar las variantes del virus y complementar las estrategias de vacunación, al mismo tiempo que permiten intervenir tempranamente en la infección, lo que resulta fundamental para individuos con sistemas inmunológicos debilitados. La proteína Spike (S) del virus, que contiene el dominio de unión al receptor42(RBD), representa un potencial target terapéutico. Al inicio de la pandemia obtuvimos Nanoanticuerpos VHHs dirigidos a la proteína S del virus wild type, 8 VHHs fueron capaces de neutralizar pseudovirus que llevan el transgen de GFP con concentraciones inhibitorias medias (IC50) que varían desde 3.36 hasta 72.68 nM, tomando como valor de referencia luego de la titulación de los stocks de pseudovirus un 30% de células que expresan GFP en ausencia de neutralización. Según estudios posteriores pudimos determinar que 5 VHHs neutralizan a través de la interacción con RBD mientras que los 3 restantes no reconocen esta región y neutralizarían mediante otro/s mecanismo/s. En este trabajo presentamos resultados de caracterización de estos VHHs frente a variantes del virus, especialmente enfocado en la neutralización de la infección. Pudimos determinar que 3 VHHs que reconocen RBD mostraron capacidad de neutralizar las variantes Alfa (IC50 18, 86 y 133 nM) y Delta (IC50 121, 173 y 384 nM). Dos VHHs neutralizaron la variante Beta (IC50 324 y 451 nM) y un VHH neutralizó las variantes de Omicron BA1 (IC50 394 nM) y BA2 (IC50 204 nM). Ningún VHH pudo neutralizar las nuevas variantes XBB y XBB.1.5. Dentro del grupo de los VHHs que no reconocen RBD pudimos determinar que todos ellos neutralizan a la variante Alfa (IC50 83, 91 y 215 nM), Omicron XBB (IC50 30, 145 y 285 nM) y Omicron XBB.1.5 (IC50 42, 136 y 317 nM). Un VHH neutraliza a la variante Delta (IC50 248 nM) y dos de ellos a las variantes Beta (IC50 112 y 235 nM), Omicron BA1 (IC50 322 y 214 nM) y Omicron BA2 (IC50 112 y 135 nM). Como conclusión podemos decir que contamos con Nanoanticuerpos VHH que en una forma de cóctel podrían ser utilizados para variantes de SARS-CoV-2 y por lo tanto representan una opción interesante para la producción de nuevos antivirales.