Modelo ortotópico de cáncer de vejiga murino con distinto grado de invasión –expresión de catepsina B

UMEREZ, MARÍA SOL; LODILLINSKY, CATALINA; ALVAREZ, VALERIA; CASABÉ, ALBERTO; SANDES, EDUARDO; EIJÁN, ANA MARÍA

BUENOS AIRES

Jornada; XXII Jornadas de Oncología. Instituto de Oncología Angel H. Roffo; 2006

Instituto de Oncología Angel H. Roffo

Introducción: La catepsina B (CB) es una cisteino-proteasa lisosomal con diferente funciones fisiológicas y patológicas. Diferentes autores la han involucrado en el proceso de invasión tumoral, nosotros demostramos en pacientes que los tumores de vejiga invasores tienen una expresión elevada de CB (Cancer 2003 jul 15, 98 (2) 262-8). Con el objeto de efectuar estudios preclínicos desarrollamos un modelo murino de tumor vesical con diferente comportamiento invasor identificados como MB49-S (superficial) y MB49-I (invasor). El objetivo de este trabajo es evaluar si la expresión de CB en los tumores MB49-S y MB49-I tiene un patrón similar a lo observado en tumores humanos. Materiales y Métodos: La inoculación ortotópica se realiza bajo anestesia general previa electrocauterización del epitelio vesical de ratones C57Bl/6J a través de un catéter (24G). La posterior inoculación de células MB49 y MB49-CP generan los tumores MB49-S y MB49-I respectivamente. El grado de invasión se estableció por histología convencional con H-E. La CB se determinó por inmunohistoquímica en cortes histológicos de tumores vesicales MB49-S y MB49-I e inmunocitoquímica de los cultivos celulares que los originan. Utilizamos un primer anticuerpo anti-CB policlonal (Santa Cruz Biotecnology) revelado con peroxidasa.(kit Biogenex). También se efectuó Western blot de lisados de células MB49-S y MB49-I, utilizando el mismo anticuerpo para CB revelado con fosfatasa alcalina (FAL). Resultados: El urotelio de la vejiga normal no expresa CB, similar a lo observado en humanos. Las células en cultivo MB49 y MB49-CP expresan CB en forma semejante, hallazgo confirmado por la presencia de una banda de 30 kDa por Western blot. Sin embargo, los tumores MB49-I presentan una mayor expresión de CB que los tumores MB49-S. Es interesante la observación que la presencia de infiltrado subyacente de células inflamatorias y tumorales produce cambios en la expresión de CB en el urotelio normal. Conclusiones: Este modelo ortotópico de CaV murino MB49-S y MB49-I reproduce los aspectos histológicos y de expresión de CB similar a la patología tumoral humana. La expresión de CB en ambos tipos celulares es semejante. El infiltrado subyacente al epitelio provoca expresión de CB en el urotelio. Estas observaciones ponen en evidencia que las interacciones célula tumoral-microambiente sería un factor relevante en la expresión de CB y en el comportamiento invasor.