Mecanismos moleculares inducidos por Bacilo Calmette Guerin (BCG) en células de cáncer de vejiga murinas MB49.

CATALINA LODILLINSKY; EDUARDO O. SANDES; ALBERTO R. CASABÉ; ANA MARIA EIJÁN

Mar del Plata-Buenos Aires

Congreso; LIII Reunión científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica.

La administración intravesical de BCG es la terapia de elección para la profilaxis de recidivas y progresión del cáncer de vejiga (CaV) in situ, superficial de alto grado o recurrente. Es de nuestro interés estudiar la acción directa de BCG sobre la célula tumoral. El óxido nítrico (NO) es producido principalmente por la NO sintasa inducible (iNOS), cuya expresión es considerada un factor de mal pronóstico en pacientes con CaV. Anteriormente observamos que BCG inhibe el crecimiento de la línea MB49 y aumenta en la producción de NO. El tratamiento combinado con BCG y PGJ-2, ligando natural de PPARg, potencia la muerte celular inducida por BCG, al mismo tiempo que inhibe la producción de NO a través de una vía independiente de PPARg. Nuestro objetivo es evaluar las vías intracelulares de muerte que induce BCG en la línea celular MB49. Las células se tratan con BCG (2mg/ml) y con o sin PGJ-2 (1 uM). Se evaluó por western blot a través del tiempo la activación de proteínas pro-apoptóticas, Bid y pro-caspasa 9 y la modulación de la vía del NF-kB. El análisis de la vía apoptótica inducida por BCG muestra activación de Bid y caspasa 9 a las 3 h post tratamiento. Por otro lado BCG induce la degradación del inhibidor de NF-kB, el IkB-a. Esto se hace evidente a los 45 min de tratamiento para luego reaparecer a las 3 h. En el tratamiento combinado con BCG y PGJ-2 se observa una recuperación del inhibidor antes que en las células tratadas con BCG sola, entre 1 y 2 h aproximadamente. BCG induce apoptosis activando proteínas de la vía intrínseca. También induce en un primer momento señales de sobrevida activando al factor de transcripción NF-kB. Este resultado nos sugiere que BCG a través de la vía de NF-kB aumenta la producción de NO posiblemente activando la transcripción de iNOS. PGJ-2 inhibiría la actividad transcripcional de NF-kB evitando la activación de sus genes blanco, como iNOS y consecuentemente la disminución de la producción de NO.