El factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) induce la expresión de la integrina β1 y promueve la migración de una línea de células trofoblásticas humanas a través de las vías de MAPK y PI3K/AKT

VERÓNICA A. FURMENTO; VERÓNICA JULIETA MARINO; VIVIANA C. BLANK

Mar del Plata

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LXII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Sociedad Argentina de Inmunología

Previamente determinamos la presencia del receptor para el factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) en la línea de células trofoblásticas Swan 71, derivada de placenta humana de primer trimestre. Demostramos que el G-CSF estimula la expresión de la metaloproteinasa-2 y la secreción del factor de crecimiento del endotelio vascular mediante la activación de Erk1/2, PI3K/Akt y del factor nuclear κB. Asimismo, si bien comprobamos que el G-CSF constituye un estímulo suficiente para estimular la migración de las células Swan 71, las vías de transducción que participan en este proceso no habían sido dilucidadas. Con el fin de estudiar las cascadas de señalización involucradas en la migración celular inducida por el G-CSF empleamos dos estrategias para bloquear las vías de MAPKs p38 y Erk1/2, y de PI3K: empleo de inhibidores farmacológicos y de mutantes dominantes negativas (DN). Mediante ?ensayos de la herida? (?wound healing assay?) observamos que luego de incubar las células Swan 71 con 100 ng/ml de G-CSF durante 16 h se produce un aumento del 20% (p<0,05; n=6) en el cierre de la herida con respecto a células incubadas en ausencia de la citoquina. Este efecto fue revertido en presencia de 2 μM SB203850 (inhibidor de p38) (p<0,001; n=4), 1 μM PD98059 (inhibidor de MEK1/2) (p<0,05; n=4) y 1 μM Ly294002 (inhibidor de PI3K) (p<0,01; n=4). Resultados similares fueron obtenidos cuando las células Swan 71 fueron transfectadas con DN de p38 (p<0,001; n=4), Erk1/2 (p<0,001; n=4) y PI3K (p<0,001; n=4). Además, por ensayos de Western blot demostramos que 100 ng/ml de G-CSF estimulan la expresión de la integrina β1 luego de 4 y 8 h de incubación. En su conjunto, los resultados obtenidos sugieren que tanto las vías de MAPKs p38 y Erk1/2 como la de PI3K/Akt favorecen la migración de células Swan 71 inducida por el G-CSF. A su vez, esta citoquina estimula la expresión de la integrina β1, un receptor clave para la adquisición de un fenotipo invasivo en células trofoblásticas.