Identificación de regiones antigénicas del factor estimulante de colonias de granulocitos mediante la síntesis de péptidos en fase sólida

V. J. MARINO; A. STERIN-PRYNC; L P ROGUIN

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; XLVI Reunión Aual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y XLIX Reunión Anual de la Sociedad de Inmunología.; 2001

Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Sociedad de Inmunología

El factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) es una citoquina que estimula la proliferación y diferenciación de precursores neutrófilos. En un trabajo previo, caracterizamos dos anticuerpos monoclonales (mAbs) anti-G-CSF y demostramos que el mAb 6E3 reconoce un epitope conformacional, mientras que el mAb 8C2 está dirigido principalmente contra un epitope secuencial. Con el propósito de estudiar la interacción del G-CSF con receptores de células de origen mieloide, investigamos el efecto de los mAbs sobre las propiedades biológicas y de unión de la citoquina. Sólo el mAb 6E3 inhibió la proliferación de células inducida por G-CSF y la unión del mismo a sus receptores. Por otro lado, el mAb 8C2 mostró un comportamiento no neutralizante y reconoció una zona expuesta en el complejo G-CSF:receptor. Para identificar los epitopes reconocidos por los mAbs, utilizamos un método de mapeo basado en la síntesis de 84 octapéptidos superpuestos que representan la secuencia completa del G-CSF. La reactividad de los mAbs con cada uno de los péptidos obtenidos se analizó por enzimoinmunoensayo. Aunque esta metodología no permitió detectar el epitope 6E3, identificamos 3 regiones reconocidas por el mAb 8C2. Dos de estas regiones definen un epitope conformacional constituido por las secuencias  39-52 y 155-164 del G-CSF. La tercer región (amino ácidos 115-124) representa un péptido homólogo al epitope 8C2 que no sería reconocida por el Ab en la estructura nativa del G-CSF.