Utilización de fosfito como agente de selección en ensayos de transformación de papa con Agrobacterium tumefaciens

ARIZMENDI AILIN; DECIMA ONETO CECILIA; FEINGOLD SERGIO ENRIQUE; MASSA, GABRIELA ALEJANDRA

Congreso; L Congreso Argentino de Genética (SAG) y II JORNADAS REGIONALES SAG-NEA; 2022

La transformación genética de plantas es una herramienta biotecnológica de alto impacto en el mejoramiento de los cultivos. Un ensayo de transformación genética exitoso necesita un protocolo de selección robusto para diferenciar las células transformadas de las que no. A su vez la utilización de agentes de selección diferentes a los utilizados actualmente como los que generan resistencia a antibióticos y/o herbicidas, mejoraría la percepción de los consumidores. La papa es el tercer cultivo de importancia alimenticia. Particularmente, el cultivar Spunta es el más utilizado en Argentina para consumo fresco. Actualmente la estrategia de transformación más utilizada en papa es la mediada por Agrobacterium tumefaciens. Las plantas de papa no pueden usar fosfito (Phi) directamente, ya que carecen de las enzimas necesarias para metabolizarlo en fosfato, y presentan efectos fitotóxicos. En este proyecto, proponemos desarrollar un protocolo de selección in vitro mediante el uso de un marcador de selección basado en el gen ptxD, derivado de Pseudomonas stutzeri WM88, que confiere la capacidad de convertir Phi en ortofosfato. Se elaboró una curva de análisis de concentraciones de KH2PO3 con plantas sin transformar para establecer la concentración óptima de selección de las plantas que contengan el gen ptxD. A partir de los resultados de la curva de sensibilidad, se seleccionó la concentración de 17,07 mM de KH2PO3. El próximo paso será transformar explantes de papa cv. Spunta mediante A. tumefaciens y evaluar la eficacia de la concentración de Phi elegida como agente de selección.