FIRST REPORT OF Rhizobium radiobacter-MEDIATED TRANSFORMATION OF THE FUNGUS Diaporthe caulivora AS A MODEL TOOL FOR STUDYING SOYBEAN-BIOTIC STRESSES INTERACTIONS

MARINA MONTOYA; MASSA GABRIELA ALEJANDRA; AZUCENA DEL CARMEN RIDAO; MABEL COLABELLI

Córdoba

Congreso; ? XXXII Reunión Argentina y XVI Congreso Latinoamericano de Fisiología Vegetal; 2018

Laproteína verde fluorescente o GFP ha sido introducida en el genoma de variosmicroorganismos, permitiendo visualizar interacciones con plantas e identificary analizar funciones de genes. La AtMT o transformación mediada por Agrobacteriumtumefaciens (también conocido como Rhizobium radiobacter) ha sidoampliamente usada como herramienta de mutagénesis insercional. Se reporta porprimera vez un protocolo adaptado de AtMT que permitió introducir el gen deresistencia a la higromicina B (hph; agente de selección) y el de la GFP(agente reportero) en el genoma del hongo Diaporthe caulivora,causante del cancro del tallo en soja. La eficiencia de la AtMT fue de 100 %.La integración y persistencia del T-DNA en el genoma fueron confirmadasmediante PCR del gen hph, antes y después de corroborar la estabilidadmitótica. El micelio emitió fluorescencia bajo microscopio. El tipode colonia, los estromas y la capacidad de desarrollar peritecios variaron enmedio de cultivo, indicando la inserción aleatoria en el genoma. En un ensayode inoculación en cámara de crecimiento se detectó patogenicidad diferencial deun subconjunto de 13 aislamientos en un cultivar de soja susceptible, siendoalgunos similares al aislamiento sin transformar. Este protocolo podría adaptarsea otras especies del género Diaporthe.